Ostry zawał mięśnia sercowego u szczurów

Szczurzy model ostrego zawału mięśnia sercowego (AMI) jest przydatny do badania wpływu MI na patofizjologiczne i fizjologiczne funkcje serca.

Ogólnym celem tej procedury jest modelowanie ostrego zawału mięśnia sercowego u szczurów w celu zbadania mechanizmów sygnalizacji serca związanych z natychmiastową odpowiedzią mięśnia sercowego na niedokrwienie serca, a następnie uszkodzenie reperfuzyjne. Odpowiedzi te obejmują rozmiar zawału, obszar ryzyka i śmierć komórki. Pierwszym krokiem jest odsłonięcie lewej komory poprzez wykonanie małego nacięcia w czwartej przestrzeni międzyżebrowej po lewej stronie klatki piersiowej i rozłożenie żeber po odizolowaniu.

Lewa przednia tętnica zstępująca lub LAD jest przejściowo podwiązana przez 30 minut po okresie niedokrwienia. Podwiązanie LAD zostaje uwolnione, co pozwala na reperfuzję serca po czterogodzinnym okresie reperfuzji. LAD jest podwiązywany ponownie przed wycięciem serca i zbadaniem pod kątem wielkości obszaru mięśnia sercowego po zawale zagrożonym i niezagrożonym.

Ostatecznie wyniki oceny histologicznej zawału. Mięsień sercowy może być wykorzystany do zbadania strategii terapeutycznych w leczeniu niewydolności serca. Technika ta może zapewnić wgląd w mechanizmy sygnalizacyjne związane z natychmiastowymi reakcjami na niedokrwienie, a następnie sprawnymi urazami, takimi jak rozmiar zawału, obszar ryzyka i śmierć komórki.

Model ten może być wykorzystany do oceny nowych strategii terapeutycznych w leczeniu choroby niedokrwiennej serca. Procedurę zademonstruje starszy pracownik naukowy i X, starszy adiunkt z laboratorium dr Bradleya McConnella na Wydziale Nauk Farmakologicznych i Farmaceutycznych Uniwersytetu w Houston, instytucjonalnego członka Texas Medical Center. Przed rozpoczęciem zabiegu chirurgicznego powierzchnię operacyjną należy zdezynfekować 70% etanolem.

Wysterylizuj wszystkie narzędzia chirurgiczne za pomocą sterylizatora z gorącymi kulkami przed każdym pojedynczym zabiegiem. Wymagane narzędzia to dwa nożyczki chirurgiczne, jeden kleszcz, jeden zakrzywiony kleszcz, dwa uchwyty na igły i retraktor klatki piersiowej. Dostosuj temperaturę systemu homeo tak, aby utrzymywał temperaturę ciała zwierzęcia na poziomie 37 plus minus jeden stopień Celsjusza.

Wielkość zawału zależy od czasu trwania okluzji, a także od temperatury ciała. Miej pod ręką bawełnianą gazę i aplikatory, aby zatamować krwawienie. W badaniach tych wykorzystywane są tylko zwierzęta, które przejdą badanie fizykalne poprzez oględziny, pomiar tętna, częstości oddechów, temperatury ciała i masy ciała.

Zapisz wagę i cechy identyfikujące zdrowe zwierzęta, które zostaną poddane operacji dzień przed operacją. Podawać dawkę masek z buprenorfiną. Przez cały czas trwania zabiegu należy nosić fartuchy i rękawiczki, a rękawiczki należy zmieniać między poszczególnymi operacjami.

Aby rozpocząć znieczulenie szczura i przygotowanie miejsca operacji, dokładnie goląc sierść z okolic szyi i klatki piersiowej. Zdezynfekuj ogolone miejsca roztworem Betadine, a następnie 70% etanolem. Powtórz tę procedurę trzy razy.

Umieść zwierzę na homeo tematycznym systemie, aby zapewnić prawidłowe utrzymanie temperatury ciała. Leżąc na prawym boku. Fazowanie krawędzi rurki polietylenowej ułatwia wprowadzenie do krtani

Wprowadzić rurkę dotchawiczą za pomocą chirurgicznego mikroskopu stereoskopowego. W razie potrzeby delikatnie manipuluj językiem i utrzymuj tchawicę w zasięgu wzroku. Podłącz rurkę dotchawiczą do respiratora pracującego z prędkością 80 oddechów na minutę i objętości oddechowej 1,2 mililitra na 100 gramów masy ciała.

Po uzyskaniu wentylacji mechanicznej umieść sterylną serwetę na szczurze, pozostawiając odsłonięty tylko obszar operacyjny. Po ustaleniu stabilnego oddechu otwórz klatkę piersiową w lewej czwartej przestrzeni międzyżebrowej. Zminimalizuj stopień wcięcia w tkankę, aby zmniejszyć ryzyko krwawienia.

Umieść zwijacz klatki piersiowej w czwartej przestrzeni międzyżebrowej i rozłóż żebra, aby odsłonić lewą komorę lub LV, należy uważać, aby nie uszkodzić płuca. Następnie otwórz osierdzie, pozostawiając go na miejscu. Jeśli to możliwe, zidentyfikuj proksymalną lewą przednią tętnicę zstępującą lub LAD za pomocą chirurgicznego mikroskopu stereoskopowego.

Przejściowo podwiązaj lub zawiąż węzłem ślizgowym LAD, aby wywołać niedokrwienie. Uważając, aby nie zewnętrzizować serca właściwego. Podwiązanie LAD potwierdza się poprzez obserwację blednięcia tkanki mięśnia sercowego dystalnie do szwu, a także dysfunkcji ściany przedniej w okresie niedokrwiennym.

Po 30-minutowym okresie niedokrwiennym rozpocznij reperfuzję serca, przecinając lub zwalniając więzadło wokół LAD za pomocą nożyczek mikrochirurgicznych. Reperfuzja jest weryfikowana przez powrót czerwonego koloru do tkanki mięśnia sercowego i wykazanie pewnego odzyskania ruchu ściany przedniej obserwowanej natychmiast po zwolnieniu podwiązania LAD. Procedura jest identyczna dla szczurów kontrolnych pozorowanych, z wyjątkiem tego, że LAD nie jest przejściowo podwiązany.

Wyjmij retraktor klatki piersiowej i narysuj żebra razem z przerwanym wzorem szwów. Po zamknięciu żeber wytwórz ujemne ciśnienie w klatce piersiowej, aby zapewnić prawidłowe oddychanie, pobierając powietrze z jamy klatki piersiowej. Na koniec zamknij skórę ciągłym wzorem szwów Po operacji umieść szczura w klatce z poduszką grzewczą i wodą, monitoruj temperaturę ciała za pomocą termometru doodbytniczego, częstość oddechów za pomocą oględzin, tętno za pomocą kołatania serca i nieprawidłowych objawów bólu, aż zwierzę zacznie chodzić.

Należy podawać jałową sól fizjologiczną. W przypadku zaobserwowania objawów odwodnienia należy podać buprenorfinę natychmiast po zabiegu. Po czterogodzinnym okresie reperfuzji umieść znieczulonego szczura z powrotem w obszarze operacyjnym.

Uwidocznij lewą komorę, jak pokazano wcześniej, i podwiąż LADA po raz drugi, w przeciwnym razie węzeł ślizgowy może zostać zawiązany. Wstrzyknij jeden mililitr 5% błękitu Evansa i soli fizjologicznej do prawej komory komory i pozostaw do perfuzji przez dwie minuty. Po tym okresie wstrzyknąć jeden mililitr nasyconego roztworu chlorku potasu do prawej komory komory, aby zatrzymać szybkie bicie serca, wyciąć serce i zanurzyć je w podgrzanym 2% buforze agrofosforanu soli fizjologicznej.

Gdy agro zestali się w temperaturze pokojowej, pokrój serce na odcinki o długości od jednego do dwóch milimetrów. Barwić żywotny mięsień sercowy 2% chlorkiem trienu tetraoleum lub TTC przez 20 minut i uchwycić obraz każdego widocznego plasterka. Oto reprezentatywny obraz serca szczura.

Po czterech godzinach reperfuzji obszar w kolorze niebieskim reprezentuje obszar perfuzyjny nieokluzowany lub niezagrożony. Czerwone obszary oznaczają obszar zagrożony zawałem, a biało-żółte obszary oznaczają zawał mięśnia sercowego w obszarze zagrożonym. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak radzić sobie z ostrym zawałem mięśnia sercowego u szczurów i modelem zwierzęcym używanym do naśladowania ludzkiej choroby niedokrwiennej serca.

Model ten można wykorzystać do badania natychmiastowych reakcji na niedokrwienie, po którym następuje uraz reperfuzyjny, który występuje w ciągu pierwszych kilku godzin, taki jak rozmiar zawału, ryzyko obszaru i śmierć komórki. Jak zaobserwowałeś w tym filmie, powodzenia w eksperymentach.