Isolation of Mouse Respiratory Epithelial Cells and Exposure to Experimental Cigarette Smoke at Air Liquid Interface

Hilaire C. Lam; Augustine M.K. Choi; Stefan W. Ryter

doi:10.3791/2513

Izolacja komórek nabłonka oddechowego myszy i narażenie na eksperymentalny dym papierosowy na gra...

JoVE Journal
Medicine

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Medicine

Isolation of Mouse Respiratory Epithelial Cells and Exposure to Experimental Cigarette Smoke at Air Liquid Interface

Izolacja komórek nabłonka oddechowego myszy i narażenie na eksperymentalny dym papierosowy na granicy faz powietrza i cieczy

Full Text

35,030 Views

10:47 min

February 21, 2011

DOI: 10.3791/2513-v

Hilaire C. Lam^1,2, Augustine M.K. Choi¹, Stefan W. Ryter¹

¹Department of Medicine, Pulmonary and Critical Care Medicine, Brigham and Women’s Hospital,Harvard Medical School, ²Cellular and Molecular Pathology, School of Medicine,University of Pittsburgh

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Komórki nabłonka płuc mogą być izolowane z dróg oddechowych myszy i hodowane na granicy powietrze-ciecz jako model zróżnicowanego nabłonka oddechowego. Opisano protokół izolacji, hodowli i wystawiania tych komórek na działanie głównego nurtu dymu papierosowego, w celu zbadania reakcji molekularnych na tę toksynę środowiskową.

Ogólnym celem tej procedury jest wyizolowanie komórek nabłonka dróg oddechowych w celu zbadania toksycznych skutków ekspozycji na dym papierosowy. Osiąga się to poprzez najpierw wypreparowanie tchawicy myszy, a następnie trawienie tchawicy w roztworze pronazy. Drugim etapem zabiegu jest pobranie komórek nabłonkowych i namnażanie kultury quid.

Trzecim krokiem jest rozróżnienie kultur na granicy faz powietrze-ciecz. Ostatnim etapem zabiegu jest wystawienie komórek nabłonka na działanie wierzchołkowego dymu papierosowego na granicy faz powietrza i cieczy. Ostatecznie można uzyskać wyniki, które pokazują w pełni zróżnicowaną monowarstwę komórek nabłonka za pomocą mikroskopii immunofluorescencyjnej.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos