Przeszczep jelita cienkiego u myszy
20 sierpnia 2007
Model transplantacji jelita cienkiego myszy jest uznawany za istotne narzędzie do badania mechanizmów odrzutu immunologicznego oraz przesiewowego badania nowych leków immunosupresyjnych. Jednak zastosowanie tego modelu jest ograniczone, ponieważ techniki w nim wykorzystywane stanowią niezwykle trudne wyzwanie techniczne. W niniejszym materiale przedstawiamy zmodyfikowaną technikę.
Nazywam się [Imię i Nazwisko], pracuję w laboratorium dr. K w Katedrze Chirurgii Uniwersytetu Kalifornijskiego w San Francisco. Dzisiaj zaprezentuję techniki mikrotransplantacji u myszy. Jak Państwo wiedzą, liczba udanych transplantacji tkanek miękkich jest ograniczona w porównaniu do transplantacji narządów litego.
Jest to prawdopodobnie spowodowane charakterystycznymi cechami jelit, takimi jak wysoka immunogenność i duża ilość bakterii, co prowadzi do wysokiego odsetka powikłań pooperacyjnych. Jest to doskonały model chirurgiczny do badania tych powikłań. Właśnie zaprezentowałem Państwu procedurę przeszczepienia jelita cienkiego u myszy.
Najważniejszymi krokami w tej procedurze są utrzymanie drożności światła jelita cienkiego dawcy oraz maksymalne skrócenie czasu operacji. Ten model transplantacji jest niezwykle użyteczny w badaniu leków immunosupresyjnych oraz mechanizmów odrzucania przeszczepu jelita cienkiego. Mam nadzieję, że teraz będą Państwo w stanie przeprowadzić tę procedurę we własnych laboratoriach.
Dziękujemy.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
Model transplantacji jelita cienkiego u myszy jest kluczowym narzędziem do badania mechanizmów odrzucania immunologicznego oraz testowania nowych leków immunosupresyjnych. Niniejsza prezentacja przedstawia zmodyfikowaną technikę mającą na celu zwiększenie wykonalności tego modelu.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Biologia transplantacji
- Immunologia
- Techniki chirurgiczne
Wstęp
- Przeszczepienie jelita cienkiego jest mniej skuteczne niż transplantacja narządów litej struktury.
- Charakterystyczne cechy jelit przyczyniają się do wysokiej immunogenności.
- Powikłania pooperacyjne są częste ze względu na obecność bakterii.
- Niniejszy model jest wartościowy w badaniu tych powikłań.
Cel badania
- Zaprezentowanie zmodyfikowanej techniki transplantacji jelita cienkiego u myszy.
- Zwiększenie odsetka sukcesu przeszczepów jelita cienkiego.
- Ułatwienie badań nad odrzuceniem immunologicznym oraz strategiami immunosupresyjnymi.
Zastosowane metody
- Prezentacja technik chirurgicznych transplantacji jelita cienkiego.
- Wykorzystanie modelu mysiego do badania wyników transplantacji.
- Ocena powikłań pooperacyjnych.
- Ocena odpowiedzi immunogennych.
Główne wyniki
- Skuteczna demonstracja zmodyfikowanej techniki transplantacji.
- Identyfikacja kluczowych czynników wpływających na sukces przeszczepu.
- Wnioski dotyczące immunogenności jelita cienkiego.
- Potencjał do usprawnionego przesiewowego badania leków immunosupresyjnych.
Wnioski
- Zmodyfikowana technika zwiększa wykonalność transplantacji jelita cienkiego u myszy.
- Model ten może w znacznym stopniu przyczynić się do zrozumienia odrzutowania immunologicznego.
- Przyszłe badania mogą wykorzystać ten model do opracowania lepszych strategii immunosupresyjnych.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Model transplantacji jelita cienkiego u myszy wypełnia istotną lukę w przedklinicznych badaniach immunologicznych, umożliwiając analizę mechanizmów odrzucania przeszczepu oraz skuteczności leków immunosupresyjnych. Model ten wspiera walidację celów terapeutycznych i ograniczanie ryzyka mechanistycznego w przypadku leków przeciwjądrzowych i gastrycznych, gdzie modele narządów pełnych nie odzwierciedlają specyficznych odpowiedzi immunologicznych jelit. Poprawa wykonalności chirurgicznej zwiększa przepustowość procesu identyfikacji wiodących cząsteczek oraz pewność prognostyczną na wczesnym etapie odkrywania leków.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne etapy odkrywania i walidacja celu
- Wartość naukowa: Umożliwia badanie specyficznych dla jelit szlaków immunogennych oraz mechanizmów odrzucania.
- Wartość operacyjna: Zapewnia powtarzalny system do walidacji celów terapeutycznych w obrębie odporności śluzówkowej.
- Wartość prognostyczna: Wspiera przedkliniczną redukcję ryzyka poprzez modelowanie typowych dla ludzi powikłań pooperacyjnych i odpowiedzi immunologicznych.
Przesiewanie i opracowywanie testu
- Wartość naukowa: Umożliwia standaryzowaną ocenę czynników immunosupresyjnych w klinicznie istotnym kontekście przeszczep przeciw gospodarzowi.
- Wartość operacyjna: Zmodyfikowana technika szycia zmniejsza liczbę błędów proceduralnych, poprawiając spójność i skalowalność analizy.
- Wartość prognostyczna: Pozwala na uzyskanie ilościowych wyników engraftmentu i odrzucania przeszczepu w celu przesiewu związków oraz optymalizacji wiodących kandydatów.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Modeluje immunologię przeszczepu jelita ludzkiego, umożliwiając odkrywanie biomarkerów translacyjnych.
- Wartość operacyjna: Wspiera długoterminowy monitoring funkcji przeszczepu i infiltracji immunologicznej.
- Wartość prognostyczna: Uzasadnia decyzje o dalszym rozwoju w oparciu o analizę ryzyka poprzez przewidywanie trajektorii odrzucenia klinicznego.
Integracja potoków i przepływów pracy
Model ten wpisuje się w kontinuum procesu odkrywania leków, od walidacji celu, poprzez identyfikację związku wiodącego, aż po przedkliniczne testy skuteczności, w szczególności w przypadku terapii immunomodulujących skierowanych przeciwko zapaleniom przewodu pokarmowego lub odrzucaniu przeszczepów.
- Biologia odkrywcza: Wspiera testowanie hipotez dotyczących szlaków punktów kontrolnych odporności oraz sygnalizacji cytokin w odrzucaniu przeszczepów.
- Przesiewy: Umożliwia standaryzowane, ilościowe odczyty przeżywalności przeszczepu oraz histologicznych wyników odrzucania.
- Analityka: Dostarcza mierzalne punkty końcowe, takie jak czas reperfuzji, częstość występowania zakrzepicy i infiltracja komórek odpornościowych do analizy porównawczej.
- Badania translacyjne: Łączy wyniki mechanistyczne z przedkliniczną walidacją schematów immunosupresyjnych.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Tworzy powtarzalną platformę chirurgiczną do iteracyjnego testowania leków i badań nad mechanizmem działania.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorczy
- Wartość naukowa: Zmniejsza niejednoznaczność mechanistyczną w odpowiedziach odpornościowych jelit i zwiększa pewność w kwestii doboru celu.
- Wartość operacyjna: Poprawia powtarzalność dzięki uproszczonej anastomozie naczyniowej i zstandaryzowanej technice szycia.
- Wartość strategiczna: Zwiększa efektywność kapitałową poprzez poprawę wskaźników sukcesu modelu i ograniczenie strat materiału doświadczalnego.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia podejmowanie decyzji go/no-go w oparciu o dane w procesach rozwoju leków immunomodulujących dzięki lepszej stratyfikacji ryzyka.
Wskazówki dotyczące wdrożenia
- Wymaga doświadczenia w technikach mikrochirurgicznych oraz znajomości anatomii gryzoni.
- Zależność od precyzyjnych narzędzi do szycia (10-0) i systemów powiększających przy anastomozie naczyniowej.
- Konieczność stosowania zestandaryzowanych protokołów opieki pooperacyjnej w celu monitorowania infekcji i funkcji przeszczepu.
- Kwestie adaptacyjne obejmują różnice w dopasowaniu wielkości dawcy do biorcy oraz czas niedokrwienia.
- Ograniczenia praktyczne obejmują złożoność modelu oraz konieczność rygorystycznego przestrzegania technik aseptyki w celu zapobiegania sepsie.
Najczęściej zadawane pytania dotyczące biofarmacji
Chapters in this video
8:09
10. locating inferior vena cava
35:32
Conclusion
11:57
20. harvesting donor small bowel
33:14
Sewing up Abdominal Cavity
8:15
11. injecting heparin into the inferior vena cava
17:15
6. suturing donor mesenteric artery to recipient aorta
27:50
3. cutting ileal end of donor small bowel
11:19
18. cutting away mesenteric tissue
12:09
Preparing Recipient Mouse for Small Bowel Transplantation
23:01
9. flipping donor small bowel in order to finish suture of mesenter
32:02
8. suturing jejunal end of donor small bowel to stoma
16:31
4. repeat procedure for aorta
1:18
Harvesting Small Bowel from Donor Mouse
8:36
12. cutting mesenteric artery
4:21
3. cleaning out small bowel contents before ligating ileum
25:56
12. releasing ligatures to open circulation to donor small bowel
2:46
2. clearing away tissue to allow ligation of small bowel
16:17
3. performing veinotomy on inferior vena cava
24:53
11. final suture for anastamosis of donor mesenteric artery to reci
1:20
1. performing Tail Pinch to Ensure Mouse is Anesthetized
4:50
4. ligating ileum
0:16
Introduction
5:20
5. exposing and ligating mesenteric vessels
13:29
2. clearing away tissue in order to apply ligatures
0:03
Title
27:20
1. clamping ileal end of donor small bowel
14:35
3. applying ligatures to inferior vena cava and inferior aorta
11:34
19. cutting portal vein
19:59
7. suturing donor portal vein to recipient inferior vena cava
26:47
Connecting Donor Small Bowel to Recipient Small Bowel
10:56
17. cutting ileal end of ligated small bowel
23:35
10. suturing donor mesenteric artery to other side of aorta
9:37
15. cutting away small bowel mesenteric tissue
7:28
8. ligating branch of portal vein
29:10
5. flipping small bowel clamps in order to suture other side of ana
30:20
6. removing clamps
6:18
6. exposing mesenteric artery which will be cut when small bowel is
15:15
1. placing donor small bowel in recipient mouse
10:27
16. cutting away mesenteric tissue until the portal vein is reached
31:14
7. creating stoma for jejunal end of donor small bowel
13:20
1. exposing inferior vena cava and aorta
15:03
Connecting Donor Small Bowel Circulation to Recipient Circulation
22:39
8. final suture for anastamosis of donor portal vein to recipient i
27:39
2. cutting recipient jejunum
9:23
14. cutting jejunal end of ligated small bowel
17:00
5. washing away blood from vessels with saline
6:42
7. exposing portal vein
7:58
9. exposing other side of mesenteric artery
15:56
puncturing inferior vena cava for veinotomy
8:54
13.clearing away tissue from mesentaric artery
28:04
4. suturing one side of donor ileum to recipient jejunum
32:40
9. cutting ligature to jejunal end of donor small bowel
