Procedura nakłucia podwiązania kątnicy

Cześć, nazywam się Miguel Toscano i pracuję w laboratorium dr Dena na wydziale Mikrobiologii i Hemelologii na Uniwersytecie Temple. Dzisiaj pokażemy Ci, jak skonfigurować model zarzutu i przebicia iCal w odmianie C 57 Black Seas Mouse. Używamy tego modelu w naszym laboratorium, aby naśladować ludzką sepsę.

Zasadniczo model ten polega na nakłuciu błony surowicznej, które umożliwia uwolnienie materiału kałowego do jamy otrzewnej w celu wytworzenia posocznicy wielodrobnoustrojowej, generując w ten sposób zaostrzoną odpowiedź immunologiczną. W tym modelu wiele narządów i różnych typów komórek ulega nieodwracalnemu uszkodzeniu. To w końcu może spowodować śmierć zwierzęcia.

Więc zacznijmy. Znieczulenie myszy. Pierwszym krokiem jest znieczulenie zwierzęcia poprzez wstrzyknięcie dootrzewnowe.

Mieszanina, jeden do jednego ketominy i ksylazyny. Aby uniknąć ugryzienia przez mysz, aby go nie skrzywdzić, musimy jedną ręką złapać mysz od ogona. Drugą ręką dociskamy się do podłogi.

Następnie możemy chwycić mysz z tyłu głowy, a następnie obrócić zwierzę na plecy, aby odsłonić brzuch. Za pomocą strzykawki insulinowej o rozmiarze 29 wstrzykujemy od 20 do 30 mikrolitrów znieczulenia do jamy otrzewnej. Przygotowując mysz do zabiegu, chwyć za grzbiet myszy i ogol jej brzuch, naciskając ogon i/lub nogę myszy.

Sprawdzamy, czy mysz nie jest wrażliwa na ból, a następnie brzuch jest dezynfekowany. Najpierw szorując roztworem Betadyny, a następnie przecierając chusteczką nasączoną alkoholem izopropylowym przez co najmniej jedną minutę. Ćwiczenie laparotomii Aby ćwiczyć laparotomię, podnosimy skórę na środku brzucha za pomocą kleszczy i wykonujemy małe nacięcie o długości około jednego centymetra.

Następnie podnieś krocze i przećwicz kolejne małe nacięcie, aby odsłonić jamę otrzewnej. Za pomocą zakrzywionych kleszczy przytrzymaj błonę otrzewną. Zidentyfikuj i odsłoń jelito ślepe, przepuszczając je przez błonę otrzewną.

Umieść go na brzuchu. Teraz jest moment podwiązania. To ważny czynnik.

W celu określenia dotkliwości modelu, możemy modulować dotkliwość procedury. Poprzez przedłużenie podwiązania myszy rozwiną łagodniejszą sepsę. Jeśli podwiązanie zostanie wykonane bliżej końca jelita ślepego, posocznica średniego stopnia, jeśli zostanie wykonana w środku, i ciężka sepsa, jeśli zostanie wykonana bliżej zastawki krętniczo-kątniczej, ciężkość zabiegu zostanie odzwierciedlona przez procent śmiertelności.

Nigdy nie podwiązuj zastawki krętniczo-kątniczej. Teraz wykonaj podwiązanie za pomocą jedwabnego szwu z podwójnym węzłem, aby był ciasny, wykonując nakłucie Przytrzymaj jelito ślepe i ostrożnie wykonaj nakłucie blisko miejsca podwiązania i wykonaj kolejne nakłucie bliżej końca jelita ślepego. Membrana secum jest miękka i bardzo łatwo ulega perforacji.

Używając igieł o różnych grubościach i wykonując jedną lub dwie perforacje, możemy również modulować nasilenie modelu. Przedstawiona tutaj metoda pojedynczego lub podwójnego nakłucia jest techniką alternatywną dla klasycznego nakłucia na wylot i na wskroś. Zaletą stosowania metody pojedynczego lub podwójnego nakłucia jest to, że można lepiej kontrolować ilość kału wytłaczanego, gdy szukają go wyciśniętego.

Przytrzymaj sekum obiema palcami i delikatnie wyciśnij jelito ślepe, aby usunąć bardzo małą ilość kału. Zamykanie laparotomii, Następnie podnieś otrzewną i ostrożnie umieść z powrotem jelito ślepe. W jamie otrzewnej.

Zachowaj szczególną ostrożność, aby uniknąć przypadkowych ukłuć jelita ślepego W przypadku kleszczy zaleca się stosowanie większych kleszczy. Nadszedł czas, aby zamknąć jamę otrzewnej. Używając jedwabnego szwu, bardzo ważne jest, aby upewnić się, że jest on bardzo dobrze zamknięty.

Zaczynamy od jednej strony rany, gdzie robimy węzeł. Kontynuuj wykonywanie szwu aż do drugiej strony, przepuszczając jedwab pod pętlą poprzedniego nakłucia. Aby zamknąć skórę, możemy użyć klipsów do nawijania Mitchella lub klipsów refleksyjnych za pomocą odpowiedniego narzędzia do zamykania klipsów.

Umieść tyle klipsów, ile potrzeba, aby upewnić się, że rana jest zamknięta. Reanimuj myszy, wstrzykując podskórnie jeden mililitr wstępnie podgrzanego roztworu soli fizjologicznej. Za pomocą igły o rozmiarze 25 ten płynny środek do resuscytacji wywoła hiperdynamiczną fazę sepsy, kończąc procedurę.

Umieść mysz pod światłem grzewczym na podczerwień lub alternatywnie nad poduszką grzewczą, aż mysz wyzdrowieje ze znieczulenia. Zapewnij jedzenie i wodę na podłodze klatki i nadzoruj zwierzęta co osiem do 12 godzin pod kątem oznak choroby. Buprenorfinę należy wstrzykiwać podskórnie w celu znieczulenia pooperacyjnego.

Innym środkiem przeciwbólowym do stosowania jest T.Tramadol. Oznaki sepsy, objawy sepsy to gorączka, letarg, pelo, erekcja, biegunka, skulenie i złe samopoczucie. Bardzo chore zwierzęta wykazują znaczny spadek temperatury ciała i prawie się nie ruszają, aby uniknąć cierpienia.

Na tym etapie powinny zostać poddane eutanazji H.So w ten sposób wykonujemy podwiązanie sierpa i model punktowy. Mamy nadzieję, że podobała Ci się demonstracja tej procedury i uznałaś ją za bardzo przydatną w Twoich badaniach przed rozpoczęciem badania na zwierzętach. Zdecydowanie zalecamy wykorzystanie starych lub nieużywanych umysłów do treningu w celu ustalenia odpowiedniego stopnia nasilenia eksperymentów poprzez modyfikację długości podwiązania, grubości igły i liczby nakłuć.

Powiedziawszy to, do widzenia.