JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:34 min. • April 30th, 2023
Podczas przerzutów raka jajnika komórki nowotworowe odrywają się od pierwotnego miejsca guza i zaczynają krążyć w jamie otrzewnej. Komórki te mogą następnie tworzyć skupiska lub sferoidy, które przylegają do monowarstwy komórek międzybłonka wyściełającej jamę otrzewnej. W miarę wzrostu guz oczyszcza leżące pod nim komórki międzybłonka, aby ułatwić inwazję.
Aby modelować klirens międzybłonka, zacznij od wysiewu komórek międzybłonka wyrażających zielone białko fluorescencyjne lub GFP do naczynia hodowlanego ze szklanym dnem pokrytego fibronektyną. Powłoka fibronektyny zapewnia matrycę, która wspomaga przyczepianie się komórek. Inkubuj naczynie, aby umożliwić komórkom międzybłonka rozprzestrzenienie się i utworzenie monowarstwy.
Następnie przenieś zawiesinę sferoid komórek raka jajnika wyrażających białko czerwonej fluorescencji na monowarstwę międzybłonka. Obrazuj kulturę przez dłuższy czas za pomocą poklatkowej mikroskopii fluorescencyjnej. Sferoidy o czerwonej fluorescencji osiądną i przyłączą się do monowarstwy międzybłonka zielono-fluorescencyjnego.
Komórki rakowe wywierają siłę na komórki międzybłonka, zakłócając połączenia komórkowe i zmieniając integralność warstwy międzybłonk
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych