JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:55 min. • April 30th, 2023
Inwazja okołonerwowa lub PNI odnosi się do migracji komórek rakowych wzdłuż nerwów, a następnie ich inwazji do krocza - odpowiedniego mikrośrodowiska dla wzrostu raka i przerzutów.
Aby naśladować PNI in vitro, zacznij od dodania kropli macierzy zewnątrzkomórkowej lub zawiesiny ECM na szalkę hodowlaną tak, aby przybrała kształt półkuli. Teraz inkubuj naczynie hodowlane, aby wzmocnić strukturalne i funkcjonalne cechy rusztowania 3D.
Następnie ostrożnie umieść wstępnie zebrany zwój korzenia grzbietowego lub DRG, skupisko neuronów czuciowych, w środku półstałej kropli ECM. Inkubować w celu osadzenia DRG w kropli ECM.
Następnie dodaj odpowiednią pożywkę wzrostową i inkubuj. ECM uzupełniony składnikami odżywczymi sprzyja kiełkowaniu DRG w małe wypustki nerwowe zwane neurytami, które wyrastają promieniście w kierunku obwodu kropli.
Usunąć zużytą pożywkę, aby przygotować kroplę ECM do kolejnego testu. Nasiona fluorescencyjnie zabarwione przylegające komórki rakowe nad kropelką. Ze względu na półkulisty kształt komórki rakowe przewracają się i osiadają wzdłuż obwodu kropelki.
Inkubuj naczynie hodowlane, aby umożliwić interakcję komórka rakowa z neurytem. Oglądane pod mikroskopem fluorescenc
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych