Model organoidów guza pęcherza moczowego: metoda ortotopowego przeszczepu organoidów pęcherza moczowego do mysiego pęcherza biorcy

Organoidy nowotworowe pochodzące od pacjenta to miniaturowe guzy powstałe z narządu macierzystego. Po przeszczepieniu do modelu zwierzęcego organoidy te zachowują większość cech fenotypowych i genetycznych pierwotnego guza, umożliwiając spersonalizowaną terapię przeciwnowotworową. Na przykład organoidy raka pęcherza moczowego barwią się dodatnio dla wielu markerów komórkowych jako odpowiadający im guz rodzicielski.

Aby opracować model organoidu guza, zacznij od hodowli organoidów guza pęcherza moczowego. Dodać zawiesinę enzymu kolagenazy do hodowli organoidów i inkubować. Kolagenaza rozkłada składniki matrycy. Teraz dodaj wstępnie podgrzaną pożywkę hodowlaną, aby uwolnić wolne organoidy w zawiesinie. Odwirować w niskiej temperaturze, aby zneutralizować wszelką resztkową aktywność kolagenazy i uzyskać osad organoidowy.

Odrzucić sklarowany osad zawierający zobojętnione enzymy i zdegradowane składniki matrycy i ponownie zawiesić osad w świeżej pożywce. Przenieść zawiesinę organoidów do pożywki wzrostowej zawierającej macierz błony podstawnej. Następnie należy pobrać zawiesinę organoidu i pożywki do strzykawki i wstrzyknąć ją w przednią ścianę chirurgicznie odsłoniętego, znieczulonego