Obrazowanie przyżyciowe oparte na oknie czaszkowym w modelu mysim: technika obrazowania służąca do badania zachowania wstępnie wstrzykniętych komórek rakowych w mózgu modelu mysiego

Obrazowanie przyżyciowe za pomocą okien obrazowania optycznego ułatwia śledzenie pojedynczych komórek w wysokiej rozdzielczości w celu zbadania ich zachowania w rodzimym mikrośrodowisku u żywego zwierzęcia.

Na początek weźmy znieczuloną mysz z mózgiem wstępnie wstrzykniętym komórkami rakowymi i z wszczepionym oknem czaszkowym mieszczącym się w metalowym pierścieniu. Komórki rakowe wyrażają jądrowe białka fluorescencyjne.

Umieść mysz ekranem do góry w polu obrazowania. Uchwyt magnetyczny w pudełku do obrazowania pomaga zabezpieczyć wszczepione okno czaszki.

Teraz przenieś pudełko do obrazowania do kontrolowanej środowiskowo komory obrazowania odwróconego mikroskopu, aby przeanalizować zachowanie komórek rakowych w mózgu.

W trybie wielofotonowym ustaw laser na odpowiednią długość fali. Skoncentruj się na regionie guza, aby wykryć fluorescencję komórek rakowych.

Zdefiniuj stos z dla każdej pozycji, aby uzyskać wiele przyżyciowych obrazów komórek nowotworowych w różnych płaszczyznach optycznych.

Ten etap umożliwia wychwycenie znacznej części komórek nowotworowych w mikrośrodowisku guza bez wpływu na rozdzielczość komórek.

Następnie uzyskuj obrazy z różnych pozycji guza przez dłuższy cz