Test neurosfery NPC: Test in vitro do oceny odpowiedzi migracyjnej neuronalnych komórek prekursorowych z neurosfery
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:02 min. • April 30th, 2023
Neurosfery to nieprzylegające kuliste agregaty nerwowych komórek prekursorowych lub NPC.
Po posianiu w określonych warunkach hodowli przylegającej, NPC mogą spontanicznie migrować z neurosfery.
Aby ocenić reakcję migracyjną NPC, najpierw przygotuj zawiesinę NPC o pożądanej gęstości w odpowiednim podłożu.
Następnie wysiewaj zawiesinę komórkową na płytce hodowlanej zawierającej pożywkę i inkubuj.
Specyficzne czynniki wzrostu w pożywkach wspomagają proliferację komórek. Dodatkowo, brak podłoża powlekającego utrzymuje komórki zawieszone w pożywkach, ułatwiając im tworzenie agregatów komórek 3D zwanych neurosferami.
Po osiągnięciu pożądanego rozmiaru zbierz neurosfery.
Odwirować i ponownie zawiesić osad neurosfery w rozcieńczonym podłożu.
Następnie umieść zawiesinę neurosfery na płytce pokrytej macierzą zewnątrzkomórkową zawierającą rozcieńczone podłoże i inkubuj.
Podczas hodowli neurosfery przylegają do macierzy zewnątrzkomórkowej.
Z biegiem czasu, ze względu na składniki macierzy zewnątrzkomórkowej, kilka NPC zaczyna migrować z dala od rdzenia neurosfery.
Teraz wyjmij nośnik i napraw komórki.
Uchwyć obrazy z kontrastem fazowym neurosfer wykazujących migrację komórek.
Za pomocą odpowie
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych