Przygotowanie rusztowania nasiennego MSC: technika przygotowania rusztowania wysianego mezenchymalnymi komórkami macierzystymi do chirurgicznej implantacji do modelu mysiego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:49 min. • July 8th, 2025
Komórki nowotworowe wytwarzają chemotaktyczne czynniki naprowadzające, aby przyciągnąć mezenchymalne komórki macierzyste lub MSCs z naczyń krwionośnych w kierunku lokalizacji guza.
Aby zbadać wpływ tych komórek na wzrost guza in vitro, zacznij od pobrania wysterylizowanego podłoża rusztowania. Przenieś go na płytkę studzienkową zawierającą żądane podłoże, aby wstępnie zwilżyć rusztowanie. Umieść go na suchej powierzchni, aby usunąć nadmiar podłoża przyklejającego się do rusztowania dla lepszej przyczepności komórek. Przenieś częściowo wysuszone rusztowanie do świeżej studzienki. Wysiewaj kroplę zawiesiny MSC na rusztowanie.
Dodatkowo dodaj więcej pożywki w rogach studni, aby stworzyć komorę hydratacyjną, która zapobiega parowaniu pożywki z kropli podczas późniejszej inkubacji. Przeprowadzić inkubację, aby MSCs mogły przylegać do powierzchni rusztowania. Odwróć rusztowanie, aby odsłonić nieobsianą powierzchnię. Odpipetować świeżą kroplę zawiesiny MSC z tej strony i pozwolić, aby MSC przylegały.
Po tym, jak MSCs przylgną do obu stron rusztowania, przykryj je większą ilością pożywki, upewniając się, że wszystkie komórki stykają się z podłożem. Inkubuj, aż MSCs wyrosną i przenikną do s
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych