Test migracji komórek macierzystych guza mózgu (BTSC) do badań nad leczeniem farmakologicznym: technika obrazowania żywych komórek in vitro w celu analizy wpływu leczenia farmakologicznego na migrację BTSC

Komórki macierzyste guza mózgu lub BTSC, subpopulacja komórek guza mózgu, mogą inicjować wzrost guza i przerzuty, co czyni je obiecującymi celami terapii raka. Aby zbadać wpływ leków na migrację BTSC in vitro, należy najpierw przygotować jednolite zawiesiny BTSC w odpowiednim podłożu. Leczyć jedną z zawiesin lekiem będącym przedmiotem zainteresowania.

W międzyczasie uzyskaj wielodołkową płytkę chemotaksji składającą się z błoniastych wkładek, które rozdzielają każdą studzienkę na górną i dolną komorę. Pipeta pożądała białko macierzy zewnątrzkomórkowej do dolnych komór i wkładek błoniastych. Inkubować w celu ułatwienia polimeryzacji białka.

Dodać odpowiednią pożywkę podstawową zawierającą pożądany chemoatraktant do dolnych komór i umieścić na błoniastych wkładkach. Następnie wysiewaj potraktowaną lekiem i nietraktowaną zawiesinę BTSC do błoniastych wkładek. Obrazuj płytkę przez dłuższy czas za pomocą mikroskopii żywych komórek.

W hodowli BTSC przylegają do matrycy białkowej wkładki. W odpowiedzi na gradient stężenia chemoatraktantu ustalony między górną i dolną komorą, nieleczone BTSC migrują przez matrycę białkową przez pory wkładki błonowej do dolnej komory.

Jednak leczenie farmak