Test inwazji neurosfery komórek macierzystych guza mózgu (BTSC): Test in vitro do analizy wpływu leczenia farmakologicznego na inwazję BTSC z neurosfery

Komórki macierzyste guza mózgu lub BTSC - podzbiór komórek w guzach mózgu - posiadają zdolności do samoodnawiania się i przyczyniają się do progresji guza i oporności na terapię. Aby określić wpływ leków na inwazję BTSC in vitro, należy rozpocząć od zawiesin BTSC w odpowiednim podłożu w kolbach hodowlanych. Leczyć jedną z zawiesin lekiem będącym przedmiotem zainteresowania.

Inkubować kolby. Składniki pożywki sprzyjają proliferacji komórek. Komórki pozostają w zawieszeniu, tworząc w ten sposób kuliste skupiska zwane neurosferami. Po osiągnięciu pożądanego rozmiaru zbierz neurosfery. Pozwól im osadzać się grawitacyjnie i usuń media. Następnie ponownie zamieszaj nieleczone i leczone lekami neurosfery w schłodzonym pożywce zawierającej odpowiednie białko macierzy zewnątrzkomórkowej i lek.

Zawiesiny umieścić w schłodzonej płytce wielodołkowej. Pozwól neurosferom osiąść na dnie studni, aby uzyskać lepsze obrazowanie. Następnie inkubuj w celu polimeryzacji białek macierzy, osadzając w nich neurosfery. Obrazuj neurosfery przez dłuższy czas za pomocą mikroskopii żywych komórek. W hodowli osadzone BTSC wydzielają enzymy proteolityczne, które degradują białka macierzy, umożliwiając migrację k