JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 5:19 min. • July 8th, 2025
Zacznij od pobrania ciężarnej, znieczulonej samicy myszy umieszczonej w pozycji leżącej. Przygotuj mysz, usuwając włosy z okolicy brzucha. Naciąć skórę i leżące pod nią warstwy mięśni, aby odsłonić rogi macicy - miejsca, w których znajdują się zdolne do życia zarodki.
Teraz wyciągnij rogi macicy z jamy brzusznej. Weź szklaną kapilarnę z ostrą końcówką zawierającą pożądany roztwór plazmidowego DNA. Zlokalizuj mózg zarodka i wstrzyknij roztwór plazmidowego DNA przez ścianę macicy do czwartej komory. Ta pozycja jest przed zawiązkiem móżdżku - pożądanym miejscem do ewentualnego dostarczenia DNA.
Po wstrzyknięciu należy cofnąć pustą kapilarę. Następnie, w celu elektroporacji zarodka, któremu wstrzyknięto DNA, umieść dwie elektrody nad ścianą macicy tak, aby elektroda dodatnia zakrywała zawiązek móżdżku, a elektroda ujemna obszar wokół uszu.
Zastosuj impulsy elektryczne przez żądany czas. Impulsy te sprawiają, że komórki neuronalne móżdżku stają się przepuszczalne, umożliwiając plazmidowemu DNA wniknięcie do docelowych komórek. Na koniec umieść rogi macicy z powrotem w jamie brzusznej w ich naturalnej pozycji. Zszyj nacięcia, przenieś mysz do klatki i pozwól jej dojść do siebie.
Zacznij
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych