Rozwarstwienie móżdżku i przygotowanie plastrów: metoda generowania wycinków tkanek z móżdżku myszy

U myszy móżdżek znajduje się u podstawy przodomózgowia i składa się z dwóch bocznych półkul połączonych linią środkową - robakiem. Móżdżek, który zawiera większość neuronów mózgu, jest niezbędny do badań neurologicznych.

Aby wygenerować wycinki móżdżku, zacznij od odciętej głowy myszy. Włóż nożyczki w otwór wielki - otwór u podstawy czaszki. Delikatnie naciąć czaszkę i usunąć ją. Następnie odwróć mózg i przetnij nerw wzrokowy i trójdzielny. Uwolnij mózg do schłodzonego podłoża preparacyjnego grzbietową stroną do góry. Oddziel tyłomózgowie od innych części mózgu.

Następnie przetnij leżące poniżej szypułki móżdżku - połączenie między móżdżkiem a pniem mózgu - aby odłączyć móżdżek. Usuń opony mózgowe z móżdżku. Ostrożnie umieść móżdżek na platformie rozdrabniacza tkanek prostopadłej do ostrza rozdrabniacza. Teraz wytnij plastry tkanki o odpowiedniej grubości. Natychmiast zwilż plastry i przenieś je z powrotem na szalkę Petriego zawierającą pożywkę do preparacji.

Oddziel i zidentyfikuj plastry od robaka. Przenieś wybrane plastry do studziennej wkładki na płytce hodowlanej zawierającej odpowiednią pożywkę wzrostową. Inkubuj kulturę, aby zachować strukturalną i funkcjonalną integralność