JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 5:10 min. • July 8th, 2025
W jajniku ssaków w pełni rozwinięte oocyty pochodzące z pęcherzyków antralnych potrzebują jedynie krótkiego okresu dojrzewania w hodowli, co jest kluczowym czynnikiem embriogenezy in vitro. Te oocyty są otoczone skupiskiem komórek somatycznych, które muszą zostać usunięte poprzez denudację, aby ułatwić wstrzyknięcie plemników.
Aby wyizolować ogołocone oocyty antralne myszy, zacznij od znieczulonej samicy myszy, której wstrzyknięto wstępnie hormon gonadotropiny w surowicy ciężarnej klaczy w celu stymulacji wzrostu pęcherzyków. Przygotuj mysz i naciąć dolną część brzucha.
Zewnętrz jelito, aby odsłonić jajniki na górze jajowodów w kształcie litery V. Wypreparuj jajnik. Przenieś go do wstępnie zbilansowanej pożywki hodowlanej, aby utrzymać żywotność oocytów. Pod mikroskopem stereoskopowym zidentyfikuj pęcherzyki antralne po ich charakterystycznej jamie wypełnionej płynem.
Za pomocą sterylnej igły nakłuj pęcherzyki antralne jajnika, aby uwolnić oocyty. Za pomocą pipety o optymalnej średnicy ostrożnie odessać oocyty, aby zabezpieczyć je przed uszkodzeniami mechanicznymi. Unikaj aspiracji komórek pęcherzykowych i innych resztek tkankowych.
Następnie przenieś oocyty do wielu kropli pożywki
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych