JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 wyświetleń • 3:58 min • July 8th, 2025
Resekcja wierzchołkowa noworodka myszy to zabieg mający na celu usunięcie wierzchołka lewej komory serca. Powstały uraz aktywuje makrofagi serca noworodka, które promują procesy komórkowe naprawy serca. Jednak ta zdolność regeneracyjna staje się ograniczona w wieku dorosłym, prowadząc do niewydolności serca. Przeszczepienie makrofagów serca noworodków do serca dorosłego może przywrócić czynność serca.
Na początek umieść nowonarodzoną mysz na lodzie, aby wywołać hipotermię, która znieczula mysz. Przenieś i przygotuj nieprzytomną mysz na platformie chirurgicznej. Teraz, pod stereoskopem, naciąć poziomo lewą stronę klatki piersiowej i oddzielić mięśnie leżące pod spodem, aby uwidocznić serce.
Wywieraj nacisk na klatkę piersiową i brzuch, aby zewnętrzizować serce. Ostrożnie odetnij tkankę wierzchołka komory, aż krwawienie odsłoni lewą komorę komory. Za pomocą bawełnianego wacika wciśnij serce z powrotem do jamy klatki piersiowej. Zszyj naciętą ścianę klatki piersiowej. Nałóż klej tkankowy, aby połączyć skórę. Następnie przenieś mysz na koc grzewczy, aby zatrzymać hipotermię. Następnie przenieś operowaną mysz noworodkową do klatki matki, aby szybko wróciła do zdrowia.
Po resekcji wierzchołkowej makrofagi serca rezydenta gromadzą się w uszkodzonym miejscu. Następnie makrofagi te można wyizolować w celu przeszczepienia do serca osoby dorosłej.
Zacznij od wstępnego schłodzenia brązowej platformy operacyjnej przez noc w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza. Wyjmij znieczuloną mysz z lodówki i połóż ją na platformie. Zakotwicz mysz w pozycji leżącej na plecach za pomocą medycznej taśmy klejącej. Umieść platformę operacyjną z myszą pod stereoskopem i zdezynfekuj klatkę piersiową myszy za pomocą podkładki przygotowawczej nasączonej betadyną i 70% alkoholem.
Naciąć skórę 1-centymetrowym nacięciem w czwartym obszarze międzyżebrowym jamy klatki piersiowej i oddzielić mięśnie międzyżebrowe za pomocą nożyczek mikrochirurgicznych, aż do uzyskania dostępu do serca. Naprzemiennie uciskaj klatkę piersiową i brzuch za pomocą dwóch kleszczy, aż serce zostanie wyjęte z klatki piersiowej, bez żadnych uszkodzeń mechanicznych.
Ustaw żebra poniżej i powyżej małego nacięcia jako naturalne unieruchomienie serca. Zlokalizuj wierzchołek lewej komory i wytnij tkankę wierzchołka komory o średnicy 1 milimetra za pomocą nożyczek do irydektomii. Upewnij się, że lewa komora komory jest odsłonięta i zaczyna sączyć.
Delikatnie wciśnij serce z powrotem do jamy klatki piersiowej za pomocą bawełnianego wacika. Zszyj mięśnie, żebra i skórę za pomocą 8-0 Zakłada się szwy proline, a po operacji mysz należy dokładnie oczyścić. Przenieś mysz z platformy operacyjnej na koc grzewczy o temperaturze 37 stopni, aby rozgrzać ciało natychmiast po operacji.
Potwierdź anabiozę myszy, obserwując oznaki spontanicznego przywrócenia oddychania, zmianę koloru skóry z bladego na różowy i ruch kończyn. Zanieś operowaną mysz z powrotem do matki, gdy wyzdrowieje. W razie potrzeby wymieszaj operowaną mysz z materiałami gniazdowymi jej matki.