Izolacja włókien mięśniowych: technika uzyskiwania pojedynczych włókien mięśniowych z zebranego mięśnia prostownika myszy Digitorum Longus (EDL)

Zacznij od uśpionej myszy w pozycji leżącej. Wysterylizuj jego tylną kończynę. Chirurgicznie usuń skórę i powięź - cienką osłonkę tkanki łącznej pod skórą - aby odsłonić leżące poniżej mięśnie kończyn tylnych.

Zlokalizuj mięsień piszczelowy przedni lub TA po bocznej stronie kości piszczelowej. Trzymając dystalne ścięgno TA, odłącz mięsień od leżącej pod nim tkanki. Przetnij mięsień blisko kolana, aby wyciąć mięsień TA, odsłaniając leżący pod spodem mięsień prostownik długi palcowy lub mięsień EDL znajdujący się w przednim przedziale kończyny tylnej.

Naciąć dystalne ścięgno EDL i pociągnąć mięsień EDL w kierunku kolana. Przeciąć proksymalne ścięgno EDL, aby wyciąć mięsień EDL. Przenieś pobrany mięsień do probówki z podgrzanym podłożem zawierającym enzymy kolagenazy i inkubuj przez odpowiedni czas. Kolagenazy rozkładają tkankę łączną otaczającą każde włókno mięśniowe lub miofiber w mięśniu. Ten etap trawienia rozluźnia włókna mięśniowe z wewnętrznej warstwy mięśnia.

Po inkubacji ostrożnie przenieś strawiony mięsień na wielodołkową płytkę zawierającą podgrzane podłoże, aby zwiększyć przeżywalność włókien mięśniowych. Przenieś płytkę do podgrzewanego stolika mikroskopu stereoskopowego.