JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:08 min. • July 8th, 2025
Aby wykonać zrobotyzowaną mikroiniekcję komórek, zacznij od załadowania schłodzonego, znakowanego fluorescencyjnie biokompatybilnego roztworu polisacharydów do zoptymalizowanej igły do mikroiniekcji. Zamontuj załadowaną igłę na uchwycie programowalnego mikromanipulatora w celu precyzyjnego pozycjonowania igły podczas mikroiniekcji.
Przenieść szalkę hodowlaną zawierającą embrionalne organotypowe wycinki tkanki mózgowej myszy w pożywce na podgrzewanym stoliku mikroskopowym w celu utrzymania fizjologicznych warunków tkanek. Skoncentruj się na podstawowej powierzchni wycinka tkanki mózgowej, który składa się z neuronów piramidowych, i zanurz igłę w pożywce, aby umieścić ją blisko neuronów, które mają być mikrowstrzyknięte.
Dostosuj ciśnienie kompensacji, aby zapobiec cofaniu się podłoża do igły poprzez działanie kapilarne.
Za pomocą oprogramowania zdefiniuj trajektorię i kąt igły. Ustawić igłę w punkcie początkowym zmapowanej trajektorii i rozpocząć automatyczny przebieg mikroiniekcji.
Igła pokonuje określoną odległość w kierunku komórki docelowej. Przyłożona siła powoduje, że igła naciska na błonę komórkową, co powoduje narastanie miejscowego napięcia i rozrywanie dwuwarstwy fosfolipi
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych