JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 2:44 min. • July 8th, 2025
Stłuszczenie wątroby jest stanem patologicznym charakteryzującym się nadmiernym gromadzeniem się tłuszczów w hepatocytach - wybitnym typie komórek wątroby. Tłuszcze odkładają się w postaci kropelek lipidów o różnej wielkości w cytoplazmie hepatocytów.
Strukturalnie kropelka lipidowa zawiera rdzeń z neutralnych, hydrofobowych tłuszczów, takich jak trójglicerydy i estry cholesterolu. Rdzeń otoczony jest monowarstwą fosfolipidową ozdobioną różnymi białkami.
Aby zobrazować odkładanie się tłuszczu, weź wielodołkową płytkę zawierającą przylegającą kulturę hepatocytów. Komórki są wstępnie traktowane pożywką steatogeniczną w celu wywołania gromadzenia się w nich kropelek lipidów.
Dodaj pożądane stężenie paraformaldehydu, który dyfunduje do komórek i sieciuje białka. Ten krok dezaktywuje proteazy i zachowuje strukturę hepatocytów. Odrzucić paraformaldehyd i dodać roztwór Oil-red-O zawierający barwnik organiczny rozpuszczony w izopropanolu.
Izopropanol działa jako rozpuszczalnik nośnikowy dla trudno rozpuszczalnych cząsteczek Oil-red-O. Pomaga to cząsteczkom barwnika dostać się do utrwalonych hepatocytów i ostatecznie dotrzeć do kropelek lipidów. Po wejściu do środka barwnik przenosi się z i
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych