JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:32 min. • July 8th, 2025
Glony to wodne organizmy fotosyntetyzujące, które wytwarzają różnorodne lipidy, z których neutralne lipidy są niezbędne do produkcji biodiesla.
Aby wykryć i określić ilościowo obojętne lipidy, wymieszaj optymalną objętość zawiesiny glonów i etanolu w czarnej płytce do mikromiareczkowania. Ściana komórkowa i błona glonów, które zapobiegają wnikaniu większości plam, stają się przepuszczalne pod wpływem etanolu. Następnie połącz etanol z rozpuszczalnym w tłuszczach barwnikiem fluorescencyjnym - czerwienią nilową. Dodaj tę mieszaninę do studni zawierającej glony.
Umieścić płytkę do mikromiareczkowania w spektrofotometrze. Ustaw program, który zapewnia inkubację z przerywanym wytrząsaniem, aby ułatwić interakcję między barwnikiem a algami.
Ponieważ czerwień nilowa jest hydrofobowa, nie może łatwo przejść przez cytoplazmę. Rozpuszczalniki, takie jak etanol, w połączeniu z czerwienią nilową mobilizują barwnik i pomagają mu dotrzeć do ciał lipidowych rozproszonych w cytoplazmie. Czerwień nilowa następnie wnika do ciał lipidowych i tam się rozpuszcza, barwiąc w ten sposób lipidy.
Komórki z niedoborem lipidów pojawiają się jako fluorescencyjne pierścienie z ciemnymi ciałami, podczas gdy komó
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych