JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 2:50 min. • July 8th, 2025
Nerwy obwodowe składają się z aksonów otoczonych komórkami Schwanna, które owijają się wokół aksonów wieloma warstwami błon komórkowych bogatych w lipidy, tworząc osłonkę mielinową.
Aby uwidocznić nerwy obwodowe, zacznij od szklanego szkiełka zawierającego stały, osadzony w żywicy, nasączony tetratlenkiem osmu poprzeczny odcinek nerwu obwodowego szczura. Sekcje zatopione w żywicy pomagają utrzymać morfologię tkanek.
Leczenie tetratoksydkiem osmu powoduje odkładanie się metalicznego osmu w warstwie lipidowej osłonki mielinowej w miejscu tkanki.
Odpipetować alkaliczny roztwór błękitu toluidynowego na wycinek tkanki. Wysuszyć szkiełko w odpowiedniej temperaturze. Warunki zasadowe i ciepło ułatwiają przenikanie błękitu toluidynowego przez żywicę do wycinka tkankowego.
Błękit toluidynowy, będący barwnikiem kationowym, wiąże się z ujemnie naładowanymi grupami fosforanowymi na DNA, a także interkaluje między parami zasad DNA w jądrach komórek Schwanna. Ponadto barwnik wiąże się z RNA w cytoplazmie, poza osłonką mielinową.
Dodać roztwór montażowy na zabarwiony odcinek nerwowy i przykryć szkiełkiem nakrywkowym, aby przygotować tkankę do obrazowania. Pod mikroskopem świetlnym warstwy osłonki
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych