JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:32 min. • July 8th, 2025
Aby uwidocznić obszary chrząstki i kości w sekcji tkanki, zacznij od szklanego szkiełka zawierającego cienki zamrożony wycinek tkanki zarodka myszy, który Cię interesuje.
Krótko rozmrozić kriosekcję i zanurzyć ją w etanolu o odpowiednim stężeniu, aby usunąć podłoże do zatapiania w krioterapii. Etap usuwania pomaga zapobiec poluzowaniu podłoża, które w przeciwnym razie mogłoby wpłynąć na wizualizację tkanki podczas barwienia. Dodatkowo etanol utrwala tkankę, utrzymując morfologię i integralność tkanki.
Następnie odpipetuj roztwór fioletu krezylowego na tkankę. Fiolet krezylowy, dodatnio naładowany, zasadowy barwnik, wiąże się z ugrupowaniami polianionowymi, takimi jak proteoglikany w macierzy tkanki chrzęstnej. Natomiast w tkankach zmineralizowanych, takich jak kości, reaguje z ujemnie naładowanymi grupami, takimi jak grupy fosforanowe w macierzy kostnej.
Będąc barwnikiem metachromatycznym, fiolet krezylowy barwi różne obszary tkanki w kolorach różniących się od naturalnego barwnika w oparciu o jego interakcję z różnymi składnikami chemicznymi w tych regionach.
Teraz umyj chusteczkę w odpowiednim stężeniu etanolu, aby usunąć nadmiar plam. Zanurz tkankę w rosnącym stężeniu etanolu, a
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych