JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:40 min. • July 8th, 2025
Podczas niedokrwienia mózgu upośledzony przepływ krwi do mózgu zmniejsza dopływ tlenu i składników odżywczych do tkanki, powodując uszkodzenie mózgu. Po krótkim niedokrwieniu, gdy przepływ krwi do mózgu zostaje przywrócony, reperfuzja ze zwiększonym dopływem tlenu powoduje nadprodukcję reaktywnych form jonów, co prowadzi do oksydacyjnego uszkodzenia tkanki, znanego jako uszkodzenie niedokrwienno-reperfuzyjne.
Aby ocenić uszkodzenie mózgu po urazie niedokrwienno-reperfuzyjnym w modelu szczurzym, najpierw zbierz mózg szczura. Wypłucz w schłodzonym buforze, aby usunąć zanieczyszczenia i krew. Przekrój mózg, aby uzyskać plastry koronalne o pożądanej grubości. Ostrożnie przenieś plastry na tacę zawierającą bufor - przednią powierzchnią skierowaną do góry - w celu późniejszego barwienia.
Dodać roztwór ciepłego chlorku trifenylotetrazolu, TTC, rozpuszczalnego w wodzie barwnika redoks, na plasterki mózgu. Inkubuj w ciemnych warunkach, ponieważ TTC jest wrażliwy na światło. TTC wnika do komórek w obrębie wycinka tkanki.
W żywych komórkach aktywny enzym dehydrogenazy miotochondrialnej bursztynianu w obecności kofaktorów redukuje TTC, bezbarwny po utlenieniu, do nierozpuszczalnego w wodzie, c
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych