Separacja wariantów kwasu mykolowego oparta na chromatografii cienkowarstwowej: metoda rozdzielania lipidów ściany komórkowej prątków na podstawie polarności

Ściana komórkowa prątków zawiera różne warianty kwasów mykolowych - długołańcuchowych kwasów tłuszczowych z konserwatywnymi łańcuchami alfa. Istnieją różnice strukturalne w ich łańcuchach beta, co skutkuje zmianami w polarności różnych kwasów mykolowych.

Aby oddzielić warianty za pomocą chromatografii cienkowarstwowej lub TLC - techniki chromatografii cieczowej - należy pobrać lipidy ściany komórkowej prątków w pożądanym rozpuszczalniku organicznym. Znajdź lipidy w pobliżu podstawy płytki TLC wstępnie pokrytej cienką warstwą materiału adsorpcyjnego, który działa jako faza stacjonarna.

Umieścić płytkę w słoiku zawierającym rozpuszczalnik organiczny - fazę ruchomą - upewniając się, że poziom cieczy znajduje się poniżej plamek próbki, aby zapobiec przedwczesnej dyfuzji kwasów mykolowych.

Podczas przebiegu faza ruchoma unosi się przez maleńkie pory warstwy adsorpcyjnej na płytce poprzez działanie kapilarne. W końcu kwasy mykolowe rozpuszczają się w rozpuszczalniku i przemieszczają się w górę.

Bardziej polarne warianty kwasu mykolowego są przejściowo adsorbowane przez polarną fazę stacjonarną poprzez siły międzycząsteczkowe, co utrudnia ich ruch w górę. Mniej polarnych kwasów mykolowych