Chromatografia gazowa w przestrzeni nadpowierzchniowej: technika oceny stężenia etanolu w zarodkach danio pręgowanego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:04 min. • July 8th, 2025
Aby przeanalizować stężenie etanolu - lotnego związku organicznego, należy rozpocząć od pobrania homogenizowanego supernatantu z hodowli zarodków danio pręgowanego traktowanego etanolem w fiolce chromatograficznej. Supernatant zawiera oprócz etanolu inne nielotne związki organiczne. Umieścić szczelnie zapieczętowaną fiolkę w próbniku zestawu chromatograficznego i podgrzać ją do odpowiedniej temperatury.
Podczas ogrzewania etanol odparowuje i migruje do fazy gazowej lub przestrzeni nad głową, pozostawiając nielotne pozostałości. Dzięki temu próbnik może wprowadzać gazowy etanol do ciągłego strumienia gazu nośnego. Działa to jak faza mobilna.
Etanol przechodzi przez wstępnie podgrzaną spiralną kolumnę chromatograficzną, która zawiera wypełnione złoże ciekłej fazy stacjonarnej. Ze względu na swoją lotność i polarność poruszające się cząsteczki etanolu zaczynają adsorbować się nad cząstkami fazy stacjonarnej, dzieląc się na fazę stacjonarną.
Ze względu na wysoką temperaturę kolumny adsorpcja cząsteczek etanolu jest niestabilna i tymczasowa, co pozwala cząsteczkom na stopniową desorpcję i migrację wzdłuż przepływu gazu nośnego. Te cząsteczki etanolu podlegają serii zdarzeń adsorpcji-des
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych