JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:45 min. • July 8th, 2025
Test immunokulek wieloanalitowych wykorzystuje wiele mikrosfer pokrytych antygenem do jednoczesnego rozpoznawania odpowiadających im przeciwciał docelowych.
Aby rozpocząć ten test, należy pobrać mieszaninę mikrogranulek do probówki zawierającej odpowiedni bufor. Każdy koralik jest pokryty określonym antygenem na swojej powierzchni, co pozwala na łatwe odróżnienie koralików od siebie.
Odpipetować powlekaną mieszaninę immunokulek do dołków płytki do mikromiareczkowania. Uzupełnij studzienki próbką surowicy zawierającą różne izotypy docelowych przeciwciał. Warianty te mają subtelne różnice w swojej strukturze, dzięki czemu każda studzienka może mieć wiele przeciwciał pierwotnych.
Inkubować, aby umożliwić próbce izotypów przeciwciał przyłączenie się do określonych antygenów wychwyconych na odpowiednich kulkach odpornościowych. Przemyć buforem testowym w celu usunięcia niezwiązanych przeciwciał pierwszorzędowych. Dodaj do dołka przeciwciała drugorzędowe oznaczone barwnikiem fluorescencyjnym, odpowiadające każdemu wariantowi przeciwciała pierwszorzędowego.
Każde znakowane przeciwciało drugorzędowe wiąże się z miejscem Fc odpowiedniego przeciwciała pierwszorzędowego. Wiele kompleksów prze
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych