JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:25 min. • July 8th, 2025
W komórkach aktywnych metabolicznie substraty zawierające węgiel są utleniane w wyniku szeregu reakcji biochemicznych w celu wytworzenia energii i uwolnienia dwutlenku węgla jako produktu ubocznego.
Aby określić szybkość utleniania substratu, zacznij od przylegającej hodowli pożądanych niezróżnicowanych komórek. Uzupełnij komórki w pożywce odpowiednim substratem zawierającym radioaktywny węgiel czternaście w szkielecie i inkubuj.
Komórki zużywają substrat i utleniają go, aby uwolnić znakowany radioaktywnie dwutlenek węgla, który dyfunduje z komórek do otaczającego środowiska.
Przenieść to podłoże do zespołu wychwytującego gaz zawierającego kwas nadchlorowy w celu wygaszenia reakcji. Ta probówka zawiera bibułę filtracyjną nasączoną wodorotlenkiem sodu umieszczoną wewnątrz nasadki probówki. Zamknij nakrętkę i rozpocznij inkubację.
Podczas inkubacji dwutlenek węgla w postaci gazowej uwalnia się do wnętrza probówki. Wodorotlenek sodu absorbuje znakowany radioaktywnie dwutlenek węgla, zatrzymując go w bibule filtracyjnej. Przenieść tę bibułę filtracyjną do fiolki zawierającej koktajl scyntylacyjny i umieścić ją w liczniku scyntylacyjnym cieczy.
Wewnątrz licznika znakowany radioaktywnie
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych