JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:10 min. • July 8th, 2025
Septyny to białka cytoszkieletu zawierające domenę wiążącą GTP otoczoną końcowymi domenami aminowymi i karboksylowymi, z nieodłączną zdolnością do samoorganizacji w włókna i struktury wyższego rzędu na wewnętrznej błonie komórkowej dla różnych funkcji komórkowych.
Aby zbadać interakcje septyna-błona in vitro przy użyciu naśladownictwa błony biologicznej, należy uzyskać wyciętą probówkę do mikrowirówki. Nałóż klej ultrafioletowy na nieprzyciętą, płaską krawędź i umieść go na plazmowym, hydrofilizowanym szkiełku nakrywkowym. Po wystawieniu na działanie światła ultrafioletowego klej utwardza się, tworząc otwartą komorę reakcyjną.
Przenieść do komory monorozproszone obojczojonowe jednolamelarne pęcherzyki lipidowe o pożądanym składzie lipidowym, uzupełnione mono- i dwuwartościowym buforem zawierającym kationy. Kationy ułatwiają adsorpcję pęcherzyków lipidowych i gromadzenie się na szkiełku nakrywkowym. Delikatnie potrząśnij komorą, inicjując pęknięcie pęcherzyków i inkubuj.
Pęknięte pęcherzyki rozwijają się i łączą ze szkiełkiem nakrywkowym poprzez swoje hydrofilowe grupy głów, tworząc płaskie dwuwarstwowe plamy lipidowe. Krawędzie plastrów powodują pękanie pozostałych pęcherzyków, two
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych