JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:25 min. • July 8th, 2025
W bakteriach Gram-ujemnych endotoksyny lipopolisacharydowe są istotnymi składnikami zewnętrznej błony bakteryjnej.
Strukturalnie endotoksyna składa się z antygenu O - najbardziej zewnętrznego łańcucha polisacharydowego połączonego centralnym rdzeniem z lipidem A, immunostymulującym glikolipidem kluczowym dla aktywności endotoksyny.
Aby zbadać aktywność endotoksyny, należy pobrać probówkę z odpowiednim buforem zawierającym przeciwciała antylipidowe A, zymosan - egzogenny aktywator neutrofili i luminol - środek chemiluminescencyjny.
Zawiesić optymalną objętość zakażonej próbki krwi zawierającej endotoksyny i komórki krwi, w tym neutrofile. Inkubować probówkę w warunkach fizjologicznych.
Podczas inkubacji przeciwciało antylipidowe A rozpoznaje składnik lipid-A endotoksyny i wiąże się z nim za pośrednictwem domen wiążących antygen, w wyniku czego powstaje kompleks przeciwciało-endotoksyna.
Domena FC przeciwciała związanego z endotoksyną wiąże się z komplementarnym receptorem neutrofili, prezentując przyłączone endotoksyny neutrofilom. To wiązanie działa jak bodziec pobudzający dla neutrofili, wyzwalając ich aktywację.
Aktywowane neutrofile pochłaniają zymozan i inicjują odpowiedź immun
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych