JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:49 min. • July 8th, 2025
Enzymy rozkładające węglowodany rozkładają złożone polisacharydy na mniejsze oligosacharydy.
Aby zbadać aktywność degradacji enzymu, zacznij od pobrania wielu chromogennych hydrożeli polimerowych, CPH, które są przygotowywane przez barwienie polisacharydów różnokolorowymi barwnikami chlorotriazynowymi. Każdy polisacharyd jest następnie chemicznie sieciowany w celu utworzenia hydrożelu - syntetycznego substratu do degradacji enzymatycznej.
Teraz dozuj różne substraty CPH do różnych studzienek porowatej płytki reakcyjnej. Dodaj roztwór aktywacyjny i inkubuj go, aby zapewnić optymalną aktywację substratów.
Umieścić płytkę testową na pustej płytce produktu. Odwirować płytki razem z niską prędkością, aby ułatwić skuteczne usuwanie roztworu aktywacyjnego przez pory płytki reakcyjnej.
Następnie uzupełnij wszystkie studzienki płytki reakcyjnej tym samym typem enzymu rozkładającego węglowodany w odpowiednim buforze, który utrzymuje optymalne pH dla aktywności enzymatycznej. Uszczelnić płytkę i inkubować ją z łagodnym mieszaniem, aby umożliwić równomierne rozprowadzenie enzymów w sieci polimerowej, umożliwiając im dostęp do substratu.
Podczas inkubacji enzym, przy odpowiedniej aktywności w s
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych