Różnicowy test barwienia jądrowego: Test mający na celu określenie cytotoksyczności mitokanu za pomocą jodku propidyny i podwójnego barwienia Hoechst

0 wyświetleń • 4:31 min. • July 8th, 2025

Mitokany to klasa leków, które selektywnie wpływają na funkcjonowanie mitochondriów w komórkach nowotworowych i indukują apoptozę.

Aby określić cytotoksyczność mitokanu, należy umieścić zawiesinę komórkową zawierającą częściowo przylegające komórki rakowe na płytce wielodołkowej. Potraktuj płytkę pożądanym roztworem mitokanu i inkubuj.

Mitokan wnika do komórki rakowej, aby zakłócić jej aktywność mitochondrialną, co ostatecznie prowadzi do śmierci komórki w komórkach rakowych wrażliwych na mitokan. Potraktuj komórki roztworem barwiącym zawierającym mieszaninę barwnika Hoechst i jodku propidyny.

Hoechst, przepuszczalny przez błonę barwnik fluorescencyjny, przenika do wszystkich komórek i wiąże się z regionem bogatym w AT ich DNA, nadając niebieską fluorescencję jądrom zarówno żywych, jak i martwych komórek.

Natomiast jodek propidyny, nieprzepuszczalny dla błony barwnik fluorescencyjny, dostaje się do martwych komórek wyłącznie przez uszkodzone części ich błon. Barwnik interkaluje między zasadami DNA, nadając martwym komórkom dodatkową czerwoną fluorescencję. Obecność obu barwników w jądrach tych komórek sprawia, że martwe komórki wydają się fioletowe.

Odwiruj płytkę z niską prędkości

Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych

Zaloguj się

Przeglądaj więcej filmów

barwnik Hoechst