Test bioreporterowy: czuła technika wykorzystująca bioluminescencyjny system reporterowy do wykrywania przeciwciał SARS-CoV-2

Podczas zakażenia koronawirusem zespołu ostrej niewydolności oddechowej 2 lub SARS-CoV-2 domena wiążąca receptor białka kolca wirusa, RBD, wiąże się z enzymem konwertującym angiotensynę 2 w komórce gospodarza, ACE2, ułatwiając wnikanie do komórek wirusa. W odpowiedzi układ odpornościowy wytwarza przeciwciała, które wiążą się z wirusowym RBD i zapobiegają wnikaniu do komórek, zmniejszając zakaźność wirusa.

Aby wykryć przeciwciała SARS-CoV-2 skierowane przeciwko RBD, należy pobrać rekombinowaną zawiesinę bioreporterową składającą się z małych fragmentów białka, połączonych z RBD kolca SARS-CoV-2. Dodaj standardowe przeciwciała SARS-CoV-2 skierowane przeciwko RBD i kulki magnetyczne wiążące przeciwciała.

Podczas inkubacji region przeciwciała Fc wiąże się z domenami wiążącymi Fc kulek. Dodatkowo rekombinowany bioreporter wiąże się z przeciwciałami SARS-CoV-2 skierowanymi do RBD związanych z kulkami.

Po inkubacji odwirować mieszaninę. Usunąć niezwiązany supernatant zawierający bioreporter. Ponownie zawiesić powiązane ściegi w buforze. Przenieść na płytkę wielodołkową.

Dodać roztwór zawierający fragmenty białkowe o dużych rozmiarach, mające wysokie powinowactwo do fragmentów białkowych o