JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:57 min. • July 8th, 2025
Komórki poddawane apoptozie - zaprogramowanej śmierci komórki - wyświetlają sygnały zjadania na powierzchni swoich komórek, ułatwiając degradację przez fagocyty - wyspecjalizowane komórki odpornościowe. Ten proces usuwania komórek apoptotycznych nazywa się efferocytozą.
Aby wykonać test efferocytozy, najpierw weź zawiesinę podwójnie barwionych komórek apoptotycznych. Powierzchnie tych komórek są znakowane biotyną, a cytoplazma jest znakowana barwnikiem śledzącym komórki, oznaczającym apoptotyczne materiały pochodzące z komórek.
Dodaj zawiesinę komórkową do kultury przylegających komórek makrofagów, które działają jako efferocyty. Wirować, wymuszając kontakt między makrofagami a komórkami apoptozy i inkubować.
Receptory efferocytarne na makrofagach wiążą się z fosfatydyloseryną - sygnałem zjadanie - na błonie komórkowej apoptozy, ułatwiając jej pochłanianie. Małe fragmenty komórki apoptotycznej są gromadzone wewnątrz pęcherzyka związanego z błoną, zwanego efferosomem.
W ten sposób powstaje frakcja zniewieściła - część komórki apoptotycznej wewnątrz makrofaga - i frakcja nieznieefferocytozowana - niezinternalizowana część komórki apoptotycznej.
Dodaj znakowaną fluorescencyjnie strept
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych