JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:01 min. • July 8th, 2025
Film łzowy - płyn ochronny pokrywający oko - pomaga nawilżyć i utrzymać komórki nabłonka rogówki oka, CEC, w zdrowym, metabolicznie aktywnym stanie. Uszkodzony film łzowy, podobnie jak w przypadku zespołu suchego oka, może powodować parowanie łez z CEC, zwiększając ich podatność na infekcje i uszkodzenia zapalne.
Preparaty zapobiegające sztucznym łzom stabilizują film łzowy i poprawiają retencję wody, zapobiegając odwodnieniu komórek.
Aby zbadać cytotoksyczne działanie testowej postaci sztucznego łez na CEC za pomocą testu alamarBlue, należy rozpocząć od przylegającej hodowli CEC pochodzenia ludzkiego w odpowiednich podłożach. Wyrzuć nośnik.
Inkubować kulturę komórkową z określonym stężeniem preparatu sztucznych łez. Preparat łzowy tworzy powłokę na komórkach. W zależności od skumulowanego działania składników składowych, komórki mogą doświadczyć utraty aktywności metabolicznej.
Następnie dodaj roztwór alamarBlue zawierający resazurynę, niebieski, słabo fluorescencyjny, nietoksyczny, rozpuszczalny w wodzie barwnik.
Rezazuryna dyfunduje do komórek i ulega nieodwracalnej redukcji w komórkach aktywnych metabolicznie, głównie przez reduktazy mitochondrialne, ponieważ przyjmuje elektron
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych