JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:00 min. • July 8th, 2025
W odpowiedzi na ranę komórki wydzielnicze wytwarzają parakrynne cząsteczki sygnałowe, które aktywują mioblasty – niezróżnicowane komórki mięśniowe. Aktywowane mioblasty migrują w kierunku miejsca rany, gdzie namnażają się, powodując gojenie się rany.
Aby ocenić zdolność migracyjną mioblastów in vitro, należy pobrać płytkę wielodołkową zawierającą zlewającą się monowarstwę mysich mioblastów. Za pomocą końcówki pipety zeskrob monowarstwę, aby utworzyć liniową, bezkomórkową plamę wewnątrz studzienki, która symuluje miejsce rany.
Ostrożnie uzupełnij studzienkę podłożem wzrostowym, nie naruszając miejsca na ranę.
Pobrać błoniastą wkładkę zawierającą przylegającą hodowlę komórek grzebienia nerwowego lub NCC - komórek wydzielniczych - w odpowiednim podłożu. Umieść wkładkę w studzience, tak aby NCC u podstawy znajdowały się w pobliżu łaty rany. Inkubuj kokulturę przez pożądany czas.
Podczas inkubacji NCC uwalniają cząsteczki sygnałowe, które wiążą się ze specyficznymi receptorami na mioblastach, inicjując kaskadę sygnałową. Ta sygnalizacja ułatwia reorganizację aktyny w mioblastach, w wyniku czego komórki te rozwijają na swoich krawędziach projekcje cytoplazmatyczne, takie jak lamellipodia
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych