JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 5:05 min. • July 8th, 2025
Mikroskopia świetlna kratowa, LLSM, umożliwia wizualizację oddziaływań receptor-ligand na powierzchni komórki w żywych komórkach z wysoką rozdzielczością czasoprzestrzenną.
Weź szkiełko nakrywkowe zawierające transdukowane komórki wyrażające ligand, emitujące czerwoną fluorescencję. Przymocuj szkiełko nakrywkowe komórką do góry na natłuszczonym uchwycie na próbkę. Zamocuj uchwyt na piezoelektrycznym stoliku mikroskopu, aby umożliwić precyzyjne pozycjonowanie próbki i skanowanie podczas obrazowania. Dostosuj ustawienia oprogramowania, aby skupić się na pojedynczej komórce wykazującej ekspresję ligandu.
Odpipetować zawiesinę komórkową wykazującą ekspresję receptora na szkiełko nakrywkowe. Receptory są znakowane zielonymi przeciwciałami znakowanymi fluoroforem. Wyobraź sobie oddziałujące pary komórek.
Laser wzbudzający mikroskopu emituje okrągłą, liniowo spolaryzowaną wiązkę laserową, która przechodzi przez cylindryczne soczewki, tworząc arkusz świetlny. Arkusz świetlny jest rzutowany na modulator, który usuwa nadmiar dyfrakcji i przekształca go w ultracienki wzór sieciowy.
Siatkowy arkusz świetlny oświetla ultracienki wycinek oddziałującej pary komórek, a fluorescencja emitowana prze
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych