Mikroskopia ciemnego pola do wizualizacji dynamiki dyfuzyjnej nanoprętów na błonie komórkowej

Aby zbadać dynamikę dyfuzji nanoprętów złota na żywej błonie komórkowej za pomocą mikroskopii ciemnego pola, DFM, w połączeniu ze śledzeniem pojedynczych cząstek, należy rozpocząć od wysterylizowanego szkiełka nakrywkowego w naczyniu hodowlanym zawierającym odpowiednią pożywkę. Dodać zawiesinę komórek na szkiełko nakrywkowe. Pożywka ułatwia wzrost komórek.

Inkubuj z dodatnio naładowanymi nanoprętami złota, które adsorbują się na ujemnie naładowanej błonie komórkowej poprzez oddziaływania elektrostatyczne. Odpipetować pożywkę z naczynia do rowka szkiełka podstawowego. Umieść szkiełko nakrywkowe komórką do dołu na rowku i uszczelnij.

Umieść szkiełko na stoliku mikroskopu ciemnego pola. Mikroskop oświetla próbkę ukośnym światłem o wysokim kącie przechodzącym przez specjalistyczny kondensor ciemnego pola.

Po oświetleniu nanoprętów, wolne elektrony na powierzchni nanopręta oscylują z częstotliwością rezonansową z padającym światłem. Oscylujące elektrony rozpraszają światło o określonej długości fali uchwyconej przez soczewkę obiektywu, umożliwiając wizualizację nanoprętów.

Podobnie błona komórkowa – składająca się z lipidów i białek – rozprasza padające światło o wyższym współczynniku z