JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:56 min. • July 8th, 2025
Nukleosomy - powtarzające się jednostki eukariotycznego DNA - składają się z segmentów DNA owiniętych wokół rdzeni białek histonowych. Rozpakowywanie DNA wokół rdzenia histonowego ma kluczowe znaczenie dla dynamiki nukleosomów.
Aby uchwycić dynamikę nukleosomów, zacznij od gładkiego, funkcjonalizowanego substratu mikowego zamontowanego na mikroskopie sił atomowych, AFM, stoliku skanera. Pokryj substrat buforem zawierającym nukleosomy.
Ujemnie naładowane DNA nukleosomu oddziałuje z dodatnimi ładunkami na funkcjonalizowanej mice, unieruchamiając je na powierzchni. Przemyj unieruchomiony substrat miki buforem, aby zapobiec przepełnieniu nukleosomów.
Przenieś stopień skanera zawierającego nukleosomy do komory obrazowania zawierającej wstępnie zamontowany wspornik, z końcówką na krawędzi i skierowaną do góry w kierunku nukleosomów.
Napełnij komorę buforem obrazowania. Ustaw wiązkę laserową na tylnym wsporniku, aby zapewnić dokładne pomiary ugięcia.
Końcówka AFM oscyluje blisko w pełni owiniętych nukleosomów i skanuje powierzchnię, aby mierzyć wysokość nukleosomów w regularnych odstępach czasu.
Spontaniczne odwijanie DNA zwiększa wysokość nukleosomów, zmieniając oscylacje końcówki i prow
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych