JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 6:47 min. • July 8th, 2025
Zacznij od inkubacji cząsteczek barwnika reporterowego Ramana z nanocząstkami złota, aby reportery związały się z nanocząstkami.
Dodać glikol polietylenowy, przeciwciała sprzężone z PEG specyficzne dla antygenu docelowego. Przeciwciała kowalencyjnie przyłączają się do nanocząstek poprzez wiązanie złoto-dwusiarczkowe. Dodaj PEG sprzężone z tiolami, aby zablokować pozostałe miejsca nanocząstek i zapobiec agregacji nanocząstek, tworząc sondy nanocząsteczkowe.
Pokryj płytki do testów immunologicznych studzienkami z docelowym antygenem. Zablokuj pozostałe miejsca płytki roztworem zawierającym białka. Dodaj sondy nanocząstek. Wykonaj seryjne rozcieńczanie sondy w poprzek dołków. Inkubuj, aby przeciwciała w sondach związały się z antygenami, tworząc kompleksy.
Użyj mikroskopu Ramana, aby określić odpowiedź optyczną sondy. Padający monochromatyczny laser wzbudza elektrony powierzchniowe nanocząstek złota i powoduje ich oscylacje, tworząc silne lokalne pole elektromagnetyczne na powierzchni sondy.
Padająca wiązka i reporterzy Ramana oddziałują ze sobą, powodując wzmocnione nieelastyczne światło lub rozpraszanie Ramana o różnych długościach fal i częstotliwościach z powodu wzmocnionego pola
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych