Wytwarzanie in vitro plazmocytoidalnych komórek dendrytycznych ze wspólnych progenitorów limfoidalnych

Plazmocytoidalne komórki dendrytyczne lub pDC to komórki odpornościowe, które reagują na infekcję, wytwarzając interferon cytokin typu I.

Aby wygenerować pDC in vitro, należy pobrać zawiesinę popularnych limfatycznych komórek progenitorowych lub CLP, wyizolowanych ze szpiku kostnego myszy. CLP mogą różnicować się w limfocyty i komórki dendrytyczne.

Dodaj zawiesinę komórkową na warstwę komórek zasilających - przylegających komórek zrębu - napromieniowanych promieniami gamma w celu zahamowania proliferacji. Komórki karmiące dostarczają cytokin i kontaktu komórka-komórka wymaganego do różnicowania CLP.

Dodaj odpowiednie stężenie liganda kinazy tyrozynowej 3 podobnego do FMS lub FL - dwuwartościowej cytokiny, która wspomaga rozwój pDC - i inkubuj.

CLP migrują między komórkami zasilającymi i namnażają się, tworząc grupy komórek, zwane obszarami brukowymi.

FL w pożywce wiąże się z receptorem Flt3 - receptorem kinazy tyrozynowej - na CLP. Wiązanie indukuje dimeryzację receptora i autofosforylację reszt tyrozyny w domenie cytoplazmatycznej.

Cytoplazmatyczne białka adaptorowe wiążą się z tymi resztami i ulegają fosforylacji, przekazując sygnał do dalszych składników sygnalizacyjnych. Kaskad