Oknowe jaja kurze do badań rozwojowych

Witamy w Kramer Lab. Nazywam się Matt Korn i jestem na Wydziale Neurobiologii i Zachowania na Uniwersytecie Kalifornijskim w Irvine. Dzisiaj pokażę Ci, jak przygotować jaja kurze do różnych manipulacji, w tym umieszczania koralików, wstrzykiwania barwników lub eksploracji in ovo.

Więc bez zbędnych ceregieli zacznijmy. Okej, więc idziemy dalej i czyścimy jajko. Powodem jest to, że w inkubatorze można założyć wiele rzeczy.

Zamierzamy to uszczelnić taśmą. Nie chcemy, aby jakiekolwiek małe kawałki przedostawały się do miejsca, w którym okno będzie dostawało komórkę jajową i zwiększały prawdopodobieństwo, że zarodek umrze do czasu, gdy będziemy chcieli go wyjąć. Więc jeśli widziałeś z inkubatora, jaja siedzą dużą stroną do góry.

Więc to, co zamierzamy zrobić, to pójdziemy dalej, weźmiemy jajko i po prostu obrócimy je na bok. A to zrobi dwie rzeczy. Po pierwsze, nasze okno będzie tutaj, a po drugie, zarodek musi unosić się na górze, abyśmy mogli dokonywać wszelkiego rodzaju manipulacji.

Zamierzam więc rozłożyć kilka z nich ze stojaka, który był w inkubatorze, do kartonowego pojemnika na jajka. W rzeczywistości jest to kawałek, który znajduje się w pudełku, gdy jaja są dostarczane. Więc na dziś pójdziemy dalej i użyjemy go tylko do przechowywania jajek.

Teraz układ jest, zależy od Ciebie. Lubię to robić w ten sposób, ponieważ w każdej chwili mam dostęp do wszystkich jaj i żadne z nich się nie styka. Na wypadek, gdybym znalazł taki, który był luźny, który miał pęknięcie i miałby go upuścić, wszystkie mają trochę miejsca od siebie.

Więc pójdę dalej i wezmę tutaj moją gazę i po prostu wyjmę ładny stos, taki jak ten, i podzielę go na dwie części. Wezmę tutaj 70% alkohol i po prostu napełnię go, aż poczuję, jak dno staje się wilgotne. A to dlatego, że zamierzam użyć całego tego stosu do wymazania wszystkich jajek.

Więc po prostu zdejmę kilka z góry, pójdę dalej i po prostu zrobię górę, ale w efekcie prawie obejdę tutaj całe jajko. A po wykonaniu tej czynności alkohol wysycha dość szybko, a następnie możemy śmiało nałożyć na niego taśmę. Taśma ładnie się trzyma i zanim skończę zestaw, zwykle pierwsza jest sucha i możemy przejść do następnego kroku w przygotowaniu jajek.

Więc znowu, umieść to z powrotem w koszu i jesteśmy gotowi, aby przejść do następnego kroku. Okej, więc teraz, gdy wszystkie nasze jajka zostały przetarte alkoholem, możemy iść dalej i zrobić otwór drenażowy po dużej stronie jajka, podstawie jajka. A to pozwoli nam wejść i wyekstrahować trochę albuminy, ponieważ jeśli nie wyekstrahujemy albuminy, zarodek nie siedzi prawidłowo.

Nie możemy dokonywać żadnych manipulacji. Polega to na tym, że biorę ostrze i biorę tę plastikową taśmę. Jest trochę elastyczny, co jest świetne.

Nie tylko pozwala nam to rozszerzyć się nad, jeśli jest trochę większa, niż byśmy chcieli, ale kiedy faktycznie pokryjemy całe jajko, będziemy musieli to rozciągnąć. Tak więc obszar, w którym ma znajdować się okno, jest całkowicie zakryty. Więc po prostu pójdę dalej i odetnę kawałek w ten sposób, a następnie zrobię około milimetrowy pasek.

A potem z tego mogę zrobić około milimetrowy kwadratowy kawałek taśmy. A potem po prostu pójdę dalej i umieszczę go tuż powyżej po lewej stronie daty. Po prostu umieść go tam i możesz to zobaczyć.

Bardzo ładnie się trzyma. Następnie mogę wrócić do paska, który już zrobiłem, odciąć kolejny milimetrowy kawałek taśmy. I znowu, po prostu umieść go na lewo od liczby, która w rzeczywistości jest górną częścią jajka.

Teraz, gdy obróciliśmy go na bok, jest w prawo. I jeszcze jeden kawałek tutaj. Teraz nie noszę rękawiczek, ponieważ noszenie rękawiczek sprawi, że ta taśma przyklei się do rękawiczek, a ja umyłem ręce.

Nie martwię się o to, że cokolwiek innego może zanieczyścić substancję czynną w tym momencie. Więc pójdę dalej i wezmę nożyczki z ostrym końcem. Zamierzam wejść w środek, w którym umieściłem taśmę i po prostu obrócić ją w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara, aż ją trochę wypełnię.

Zobaczysz, że jest tam mała. Teraz otwór nie musi być bardzo duży, ponieważ kiedy włożymy tam tę strzykawkę, sprawi, że otwór będzie wystarczająco duży. Ale to jest tak, że nie wchodzimy od razu z igłą i nie próbujemy rozbić jajka za jego pomocą, ponieważ często prowadzi to do rozpadu całej strony jajka.

Wtedy nie możemy już używać jajka. Dobra, więc teraz przejdę dalej i osuszę jajko. Mamy ten ładny mały otwór z boku i zamierzam użyć tej 10-mililitrowej strzykawki i dość dużej igły, aby iść dalej i wyekstrahować albuminę.

Teraz chcę około trzech lub czterech mililitrów, zdecydowanie więcej niż trzy, niewiele więcej niż cztery i pół lub pięć. Pozwoli to naszemu zarodkowi, który teraz siedzi na wierzchu, nieco odsunąć się od skorupy. A wtedy będziemy mogli dokonywać naszych manipulacji.

Więc wchodząc pod kątem 45 stopni, jestem pod żółtkiem. A potem chcę obrócić go trochę w prawo, żeby prześlizgnąć się pod nim i można poczuć, jak końcówka igły dotyka dna jajka. Zamierzam wyekstrahować tylko trzy lub cztery i wychodzi całkiem nieźle.

Zamierzam iść dalej i umieścić tę albuminę w moim wiadrze w talii tutaj i teraz mogę kontynuować z innymi jajkami. Okej, więc pójdę dalej i będę kontynuować. I zobaczysz tutaj, że otwór, który zrobiłem do opróżniania, jest trochę większy niż bym chciał, ale okazuje się, że to jest w porządku.

To, o co chcę się martwić, to to, że kiedy wbijam igłę, już jej nie łamię. Więc zamierzam iść dalej i to zrobić. Okej, więc już widzę, że jajko ma w sobie trochę pęknięcia.

Teraz małe pęknięcia są w porządku, ale musisz być zaniepokojony, gdy rozciągają się na inną płaszczyznę jajka. I w tym przypadku tak jest. Widać to z.

Rozciąga się prawie do góry. I tak naprawdę to właśnie tam będzie nasze okno. Więc na nieszczęście dla tego jajka, będziemy musieli to wyrzucić.

I nie ma nic specjalnego w wyrzucaniu go. Nie musisz pisać konkretnego protokołu ani nic. Po prostu pójdę dalej i wrzucę go do wiadra na odpady.

Używamy tych czarnych koszy na śmieci, aby oznaczyć je jako odpady zwierzęce, ale poza tym już się tym zajmieliśmy. Możemy przejść do następnego jajka. Okej, więc teraz, gdy odsączyliśmy wszystkie nasze jajka, możemy śmiało zakryć otwór odpływowy.

Jest to ważne, ponieważ jeśli nie wejdziemy do wnętrza inkubatora, możemy uzyskać ogromne parowanie tego, co pozostało z albuminy. A jajko, które jest suche, jest jajkiem, które jest martwe. Więc pójdziemy dalej i po prostu weźmiemy mniej więcej ten sam rozmiar taśmy i umieścimy ją nad otworem, a nie będziemy musieli się martwić o ponowne wchodzenie do tej.

W niektórych przypadkach, jeśli zdecydujesz, że chciałbyś spróbować odsączyć więcej albuminy z jajka, po jego otwarciu ten otwór działa jak trochę uszczelniony obszar, w który możesz następnie wbić igłę i nie stracisz dużo albuminy. Okej, prawda? Okej, więc teraz przejdziemy dalej i przykryjemy jajka ładnym kawałkiem taśmy.

Porównuję to do nałożenia kawałka taśmy na balon przed włożeniem do niego małej szpilki. Fajne jest to, że balon nie pęka i w tym przypadku mała taśma na jajku. Jajko nie pęka w wielu miejscach, a następnie okno można uszczelnić, a następnie, gdy okno się zamyka, ponieważ użyliśmy taśmy, tworzy to ładną małą uszczelkę i nie musimy się martwić o parowanie.

Więc widzicie, rozmiar taśmy jest, prawdopodobnie największy, jaki do tej pory przeciąłem, ale nawet wtedy zamierzam ją trochę rozciągnąć i naprawdę po prostu pociągnąć za nią, trochę naprężyć i umieścić ją nad jajkiem. Zamierzam obejść tył i bardzo ostrożnie rozciągnąć go na jajku, żeby nie było zagnieceń w miejscu, gdzie będzie moje okno. I możesz trochę zresetować taśmę.

Chodzi o to, że nie przykleja się tak bardzo, że musisz się martwić. Jak raz utknie, to już utknie. I widzicie, ten ogólny obszar tutaj jest miejscem, w którym zamierzam pójść dalej i przeciąć okno.

Okej, więc teraz, gdy mamy taśmę na wszystkich jajkach, możemy śmiało wyciąć okno na górze. To może być najtrudniejsza część i często to właśnie w tym miejscu stracisz większość swoich jaj. Więc po prostu pójdę dalej i dobrze przetrzem moje nożyczki gazą, na której był alkohol, a następnie po prostu wysuszę.

Alkohol prawie sam wysycha, ale nie chcesz, aby alkohol dostał się prosto do jajka. Więc zamierzam po prostu wejść w środek miejsca, w którym znajduje się taśma i ponownie użyć tego ruchu zgodnie z ruchem wskazówek zegara, przeciwnie do ruchu wskazówek zegara, aż usłyszę, jak trochę pęka. I wtedy wiem, że moje ostrze jest w środku.

A potem mam ochotę wysunąć nożyczki tak, żeby prawie przylegały płasko do powierzchni jajka. A potem po prostu rób małe nacięcia, aż będę mógł włożyć tam cały kawałek nożyczek. Wrócę w drugą stronę, kiedy już zrobię pół koła i nie chcę kończyć koła, bo chcę mieć okno, ale potem mogę po prostu iść dalej i otworzyć jajko.

W tej chwili wygląda na to, że są mniej więcej w tym samym wieku, w którym się spodziewałem, nie mają zbyt wielu naczyń krwionośnych, ale jest trochę krwi wokół miejsca, w którym znajduje się zarodek, głównie z obszaru delionu, w którym krew się teraz zaczęła i bicie serca zniknęło. Więc po prostu to zamknę, po prostu niech to siedzi na wierzchu w ten sposób i znowu się obróci, a ja pójdę dalej i zamknę okna. I znowu, po prostu, płasko na powierzchnię i z powrotem w drugą stronę.

I okej, więc mamy tutaj kilka bąbelków i okazuje się, że zarodek jest z boku. Są dwie rzeczy, które możemy zrobić już teraz. Jeśli mamy dużo jajek i nie martwimy się o użycie każdego z nich, możemy śmiało to wyrzucić.

Albo to, co możemy zrobić, to możemy zamknąć okno i po prostu ustawić je tak, aby zarodek unosił się na górze, gdzie chcemy, aby znowu był. A zanim dojdziemy do niego w naszych manipulacjach, może być tam, gdzie chcemy. Jeśli nie, możemy go wtedy wyrzucić.

Więc to, co tutaj zrobiłem, to po prostu ustaw go pod kątem. Będziesz miał trochę spływu albuminy, ale pomoże to temu zarodkowi wrócić do miejsca, w którym powinien być. Okej, więc teraz, gdy mamy wszystkie te okna, musimy upewnić się, że są zamknięte i po prostu chcemy, aby zostały zamknięte, zanim dokonamy jakichkolwiek manipulacji.

A potem możemy iść dalej i ponownie zamknąć jajko. Ale jeśli mamy otwarte okno, czasami jarzmo może się wysunąć. Jeśli wiesz, że jajko tylko trochę się przechyla, gdy przechodzisz z jednego pokoju do drugiego, nie chcesz, aby wszystko wypadło.

Więc wszystko, co robię, to wycinanie kolejnego milimetra długości, lub przepraszam, milimetra szerokości, prawdopodobnie około trzech, dwóch lub trzech milimetrów i długości kawałka plastikowej taśmy. Lubię umieszczać go tam na samym środku. A jeśli uda mi się pociągnąć go w dół przed jajkiem, to w pewnym sensie sprawia, że jest ciasny.

I możecie zobaczyć, gdzie pasuje okno, dokładnie tam, gdzie była druga taśma, gdzie przecięliśmy okno i to sprawia, że jest dość szczelne jak na ten czas. Chodzi mi o to, że za chwilę dokonamy kilku manipulacji, więc nie musi to być całkowicie szczelne. W ten sposób przygotowujesz i okrasz jajka.

Życzymy więc powodzenia w eksperymentach.