Nanoiniekcja wirusa do klatki piersiowej w celu zbadania interakcji gospodarz-wirus u dorosłych much

Weź znieczulonego samca Drosophila typu dzikiego i zmutowanego Dicer-2 na miskę iniekcyjną pod mikroskopem stereoskopowym. Upewnij się, że muchy są wolne od wszelkich symbiotycznych bakterii, które hamują replikację wirusa RNA.

Zaszczepić muchy wewnątrz klatki piersiowej nanowstrzykiwaczem zawierającym jednoniciową zawiesinę wirusa RNA o dodatnim wykrywaniu.

Wirus wnika do komórki gospodarza poprzez endocytozę za pośrednictwem receptora i replikuje się, wytwarzając dwuniciowe pośrednie RNA. Receptor rozpoznawania wzorca gospodarza Dicer-2 przetwarza dwuniciowy RNA wirusa na małe interferujące RNA, siRNA.

SiRNA wiąże się z kompleksem wyciszającym indukowanym przez RNA, RISC, gdzie usuwana jest jego komplementarna nić. SiRNA załadowane RISC wiążą się z innymi wirusowymi RNA poprzez komplementarne parowanie zasad, powodując degradację wirusowego RNA i wyciszenie genów.

Interakcja Dicer-2 i wirusowego RNA aktywuje kaskady sygnalizacji przeciwwirusowej, wytwarzając białka przeciwwirusowe. Te białka przeciwwirusowe oddziałują z kinazą janusową lub JAK sąsiednich komórek gospodarza receptorami cytokin związanymi z białkami, inicjując dimeryzację receptorów i fosforylację JAK.

Aktywowane J