Technika oceny lokalizacji in vivo przeciwciał specyficznych dla nowotworu
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:13 min. • July 8th, 2025
Weźmy zawiesinę komórek ludzkiego raka jajnika. Dodaj podłoże z matrycą błony podstawnej i trzymaj na lodzie, aby uniknąć tworzenia się żelu.
Załaduj mieszaninę do strzykawki i wstrzyknij podskórnie do atymicznej myszy nude. Usunąć igłę, gdy matryca zostanie poddana żelowaniu, zapobiegając wydaleniu mieszaniny.
Brak odpowiedzi immunologicznej u myszy z niedoborem odporności zachowuje żywotność wstrzykniętych komórek. Białka macierzy zewnątrzkomórkowej i czynniki wzrostu zawarte w żelu dostarczają sygnałów stymulujących wzrost, ułatwiając powstawanie guza.
Komórki nowotworowe nadmiernie eksprymują powierzchniowy receptor kwasu foliowego alfa-1 lub FOLR1.
Weź przeciwciała specyficzne dla FOLR1. Dodać barwnik fluorescencyjny i inkubować, umożliwiając koniugację barwnika z przeciwciałami.
Dożylnie wstrzyknąć znakowane przeciwciała do znieczulonej myszy z guzem.
Przeciwciała docierają do guza poprzez krążenie i wiążą się z FOLR1 na komórkach nowotworowych, znakując fluorescencyjnie powierzchnię komórki.
Wykonaj obrazowanie fluorescencyjne in vivo. Po wzbudzeniu barwnik wydziela fluorescencję, ułatwiając ocenę lokalizacji przeciwciał w guzie.
Dializować 0,5 mililitra przeciwciała za pomo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych