Wytwarzanie wariantów ucieczki wirusa grypy przeciwko przeciwciałom neutralizującym

Należy pobrać zawiesinę wirusa grypy, zawierającą zarówno szczepy typu dzikiego, jak i zmutowane.

Glikoproteina otoczki wirusa zwana hemaglutyniną lub HA wiąże się z kwasem sjalowym na powierzchni komórki gospodarza, pośrednicząc w wnikaniu wirusa.

Dodaj przeciwciało neutralizujące w malejących stężeniach, które wiąże się z kwasem hialowym, blokując miejsce wiązania kwasu sjalowego.

Zmutowane szczepy, przenoszące mutacje w HA, które pomagają uniknąć neutralizacji przeciwciał, nazywane są wariantami ucieczki.

Wstrzyknąć mieszaninę do wolnych od patogenów zarodków kurzych, dostarczając wirusy do płynu omoczniowego i inkubować.

Wirusy zneutralizowane przez przeciwciała nie mogą przedostać się do komórek błony kosmówkowej omoczniowej. Niezneutralizowane zmutowane wirusy dostają się do komórek, replikują się i są uwalniane do płynu omoczniowego.

Zbierz płyn omoczniowy zawierający populację wirusa.

Wprowadzić przeciwciało swoiste dla HA w malejących stężeniach, które neutralizuje inne szczepy z wyjątkiem wariantów ucieczki.

Wprowadź czerwone krwinki kurczaka lub RBC. Niezneutralizowane warianty ucieczki wiążą się z komórkami, powodując zlepianie się erytrocytów - zwane hemaglutynacją, po