Wykorzystanie tomografii fluorescencyjnej do oceny zapalenia jelit myszy
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:06 min. • July 8th, 2025
Pozwól myszy w klatce spożywać wodę pitną zmieszaną z syntetycznym siarczanowanym polisacharydem, o którym wiadomo, że wywołuje zapalenie jelita grubego, nieswoiste zapalenie jelit.
Ten polisacharyd przenika do światła jelita i narusza barierę nabłonkową, umożliwiając drobnoustrojom komensalnym przenikanie do tkanki, prowadząc do stanu zapalnego.
Monocyty infiltrują tkankę i różnicują się w makrofagi.
Dożylnie wstrzyknąć przeciwciała sprzężone z fluoroforem do ogona myszy.
Przeciwciała docierają do okrężnicy i wiążą się z docelową glikoproteiną na makrofagach, znakując komórki.
Znieczulij mysz. Ogol sierść na brzuchu, aby zminimalizować odbicie i absorpcję światła podczas obrazowania.
Umieść mysz w kasecie z badaniem i włóż ją do tomografii fluorescencyjnej lub skanera FMT.
Po wzbudzeniu fluorofor emituje fluorescencję. Uchwyć obrazy odbicia fluorescencji, aby zrekonstruować trójwymiarową mapę przedstawiającą rozkład przestrzenny fluoroforów.
Podwyższona intensywność fluorescencji wskazuje na zwiększoną infiltrację makrofagów.
Aby wywołać zapalenie jelita grubego, napełnij zapas wody pitnej myszy eksperymentalnych 2 gramami siarczanu sodu dekstranu lub DSS, rozpuszczonymi w 100 mil
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych