Technologia Snap Chip do wielowarstwowego testu immunologicznego bez reaktywności krzyżowej
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:36 min. • July 8th, 2025
Rozpocznij od złożenia wstępnie poddanego obróbce szkiełka testowego mikromacierzy z wyraźnymi plamkami zawierającymi specyficzne dla białka przeciwciała wychwytujące do wykrywania wielu białek.
Załadować rozcieńczenia wzorca białkowego i wstępnie rozcieńczone próbki surowicy do oddzielnych studzienek. Rozcieńczenia te tworzą szereg stężeń białka w celu dokładnej oceny ilościowej.
Inkubować, aby ułatwić interakcje białko-przeciwciało. Umyj w celu usunięcia niezwiązanych białek, zdemontuj i wysusz szkiełko.
Odwrócić szkiełko testowe w aparacie zatrzaskowym zawierającym uwodniony szkiełko transferowe nakrapiane specyficznymi dla białka biotynylowanymi przeciwciałami wykrywającymi w tych samych pozycjach, co szkiełko testowe.
Zamknij urządzenie i naciśnij, aby zatrzasnąć szkiełka jedna na drugiej. Ułatwia to przenoszenie przeciwciał detekcyjnych do odpowiednich miejsc na szkiełku testowym, minimalizując reaktywność krzyżową.
Oddziel szkiełka, aby umożliwić interakcję przeciwciał detekcyjnych z białkami związanymi, tworząc immunokompleksy.
Ponownie złóż szkiełko testowe, przepłucz je i wprowadź streptawidynę sprzężoną z fluoroforem, wchodząc w interakcję z biotynylowanymi przeciwciałam
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych