JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:50 min. • July 8th, 2025
Podłączyć strzykawkę z rurką dozującą do pompy. Strzykawka zawiera mieszankę fotoinicjatora i poliestru, unikalną mieszankę polimerów.
Dozować mieszaninę do lepkiego wodnego roztworu polimeru na bazie celulozy. Powoduje to separację faz, tworząc polimeryczną sferyczną strukturę zwaną polipęcherzykiem.
Promieniowanie ultrafioletowe aktywuje fotoinicjator, powodując usieciowanie polimeru i utworzenie powłoki otaczającej wewnętrzny rdzeń.
Następnie włóż igłę, aby wstrzyknąć lepki roztwór cząsteczek znakowanych fluoroforem do rdzenia polipęcherzykowego.
Ponownie napromieniować, aby przywrócić integralność polipęcherzyków. Liofilizować w celu usunięcia nadmiaru wody i odzyskania polipęcherzyków.
Aby sprawdzić profil uwalniania, należy inkubować pęcherzyk w buforze.
W kontakcie z fazą wodną powłoka polimerowa ulega erozji, tworząc w ten sposób pory. Z biegiem czasu pory te łączą się ze sobą, uwalniając znakowane cząsteczki.
Regularnie zbierać supernatant i określać ilościowo intensywność fluorescencji.
Nagły wzrost fluorescencji po dłuższej inkubacji potwierdza opóźnione uwalnianie impulsu.
Aby wytworzyć pęcherzyki, najpierw użyj 1-mililitrowej pipety transferowej, aby dodać 800 mikrolit
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych