Metoda leczenia komórek dendrytycznych o wysokiej zawartości soli i ich adoptywnego transferu do myszy

Rozpocząć od płytki wielodołkowej zawierającej zawiesinę komórek dendrytycznych lub DC.

Aby naśladować stan nadciśnieniowy, dodaj pożywkę hodowlaną zawierającą wysokie stężenie jonów sodu i inkubuj.

Podczas inkubacji jony sodu dostają się do komórki, zwiększając wewnątrzkomórkowe stężenie sodu.

Powoduje to wymianę wewnątrzkomórkowych jonów sodu z zewnątrzkomórkowymi jonami wapnia.

Zwiększony wewnętrzny poziom wapnia aktywuje szlaki, które ułatwiają wytwarzanie reaktywnych aldehydów, które wiążą się z białkami komórkowymi. To aktywuje DC, które wyświetlają te zmodyfikowane białka na swojej powierzchni.

Po inkubacji zebrać komórki do probówki i odwirować.

Usunąć supernatant. Dodaj nowy bufor, aby ponownie zawiesić komórki.

Pobrać zawiesinę komórek do strzykawki.

Weź znieczuloną mysz i wstrzyknij zawiesinę komórkową zadoczodołowo, która jest obszarem za oczodołem.

Ten proces wstrzykiwania aktywowanych komórek odpornościowych nazywa się adoptywnym transferem komórek.

Odpipetować 900 mikrolitrów zawiesiny DC do 24-dołkowej płaskiej płytki sokoła z płaskim dnem. Dodać 100 mikrolitrów pożywki hodowlanej prądu stałego o wysokiej zawartości soli do każdej studzienki, aby uzyskać końcowe stę