Metoda biodruku 3D mysich astrocytów korowych

Weź zawiesinę astrocytów.

Dodaj roztwór biotuszu zawierający żelatynę, fotosieciowalne pochodne żelatyny, fotoinicjatory, fibrynogen i lamininę.

Przenieść zawiesinę do strzykawki z igłą

.

Schłodzić strzykawkę w celu żelowania biotuszu. Podłączyć strzykawkę do głowicy drukującej biodrukarki.

Umieścić igłę odpowiednio na płytce hodowlanej. Rozpocznij biodruk z ustalonymi parametrami i projektem.

Biotusz zawierający astrocyty jest wypychany z igły i osadza się warstwami na płytce, tworząc trójwymiarową strukturę z uwięzionymi astrocytami.

Wystaw biodrukowaną konstrukcję na działanie światła ultrafioletowego. Fotoinicjator pomaga w sieciowaniu pochodnej żelatyny, zwiększając stabilność biokonstrukcji.

Leczyć trombiną i jonami wapnia.

Trombina, z jonami wapnia, przekształca fibrynogen w fibrynę, łącząc się w stabilną sieć biopolimerów 3D.

Wyrzucić roztwór i przemyć buforem w celu usunięcia środków sieciujących.

Dodaj pożywkę astrocytową i inkubuj. Laminina wspomaga adhezję i rozprzestrzenianie się astrocytów, tworząc tkankę neuronalną 3D bogatą w astrocyty.

Aby uzyskać końcowe stężenie 1 x 10⁶ komórek na mililitr, przenieś 1 mililitr roztworu żelatyny-żelatyny-metakryloilo-fibrynogenu do