Barwienie immunologiczne tkanek do obrazowania cytometrii masowej

0 wyświetleń3:33 min • January 15th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Umieść szkiełko podstawowe z utrwaloną próbką tkanki w buforze do pobierania antygenu i podgrzej je.

Podwyższona temperatura i zasadowe pH buforu przerywają wiązania krzyżowe białek wywołane wiązaniem, odsłaniając epitopy antygenów.

Schłodzić szkiełko, aby zapobiec uszkodzeniom tkanek wywołanym wysoką temperaturą, a następnie spłukać, aby usunąć nadmiar buforu.

Zastosuj barierę hydrofobową i umieść szkiełko w komorze wilgotnościowej.

Dodaj bufor blokujący przenikanie. Detergent zawarty w buforze przenika przez błony komórkowe, a białka blokujące maskują niespecyficzne miejsca wiązania, aby zmniejszyć barwienie tła.

Usuń nadmiar buforu, dodaj koktajl przeciwciał sprzężonych z metalem i inkubuj, aby umożliwić wiązanie przeciwciał ze specyficznymi antygenami.

Umyć szkiełko, usuwając niezwiązane przeciwciała.

Dodaj sprzężone z metalem barwienie jądrowe, które dostaje się do komórek i wiąże się z DNA.

Spłucz nadmiar plamy i osusz szkiełko.

Za pomocą skanera optycznego można uzyskać obrazy o wysokiej rozdzielczości cech strukturalnych tkanki, co pomaga w interpretacji danych z analizy obrazowej cytometrii masowej barwionej próbki.

Rozpocznij od wstępnie potraktowanego wycinka tkanki o grubości pięciu mikrometrów, zamontowanego na szkiełku zgodnym z barwieniem immunologicznym. Umieść slajdy w koperze do przenoszenia.

W celu pobrania epitopu wywołanego ciepłem lub HIER, dodaj bufor HIER do szkiełka, aż tkanka zostanie całkowicie zanurzona. Umieść kopertę szkiełkową w komorze maskującej i uruchom program ogrzewania.

Po zakończeniu programu umieść kopertę do slajdów na tacy wypełnionej zimną wodą i pozwól jej ostygnąć. Kilkakrotnie przepłukać szkiełka wodą destylowaną, stopniowo zwiększając objętość.

Wyjmij szkiełka z koperty do slajdów i zetrzyj nadmiar bufora. Aby zapobiec utracie buforu blokującego i przeciwciał, należy otoczyć tkankę za pomocą hydrofobowego pisaka barierowego.

Inkubuj szkiełka w dostosowanej do potrzeb komory wilgotnościowej przez godzinę. W przypadku niespecyficznego blokowania należy dodać bufor blokujący do szkiełek w komorze wilgotnościowej. Po okresie inkubacji usunąć nadmiar buforu blokującego i pozostawić pozostały bufor do wyschnięcia na powietrzu w temperaturze pokojowej.

Ostrożnie dodaj roztwór przeciwciała na tkankę i inkubuj przez noc w komorze wilgotnościowej w temperaturze czterech stopni Celsjusza.

Po inkubacji przemywać szkiełko PBS zawierającym tryton przez 5 minut. Na koniec przepłukać szkiełko dwukrotnie PBS przez 5 minut każdy. Teraz potraktuj tkankę barwnikiem interkalatorowym i inkubuj ją w komorze wilgotnościowej w temperaturze pokojowej przez trzydzieści minut.

Po inkubacji przemyć szkiełko wodą o wysokiej jakości HPLC przez pięć minut i wysuszyć je w eksykatorze przez trzydzieści minut.

Po wyschnięciu szkiełka zeskanuj go za pomocą płaskiego skanera dokumentów z rozdzielczością nie mniejszą niż 1200 punktów na cal.

08:48

Identyfikacja zewnątrzkomórkowych pułapek neutrofilowych w zatopionych w parafinie zakrzepach tętniczych kotów przy użyciu mikroskopii immunofluorescencyjnej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:36

Połączenie hybrydyzacji fluorescencji in situ multipleksowej z immunohistochemią fluorescencyjną na świeżo zamrożonych lub utrwalonych wycinkach mózgu myszy

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:38

Wykrywanie nieprawidłowego białka prionowego za pomocą immunohistochemii

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:27

Ilościowa analiza wielospektralna po przeszczepie tkanki fluorescencyjnej w celu wizualizacji pochodzenia, typów i interakcji komórek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:28

Przygotowanie próbki do analizy cytometrii masowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:49

Zautomatyzowany multipleksowy panel immunofluorescencyjny do badań immunoonkologicznych na próbkach tkanek raka utrwalonego formaliną

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:34

Izolacja i barwienie keratynocytów skóry myszy do specyficznej dla cyklu komórkowego analizy ekspresji białek komórkowych za pomocą cytometrii masowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:00

Wizualizacja, kwantyfikacja i mapowanie populacji komórek odpornościowych w mikrośrodowisku guza

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:50

Szybka metoda wielospektralnego obrazowania fluorescencyjnego zamrożonych skrawków tkanek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:47

Poszerzanie wiedzy na temat mikrośrodowiska guza za pomocą obrazowania spektrometrią mas próbek tkanek utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026